[发明专利]一种Exendin-4衍生物的重组制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 200910054102.0 申请日: 2009-06-29
公开(公告)号: CN101665799A 公开(公告)日: 2010-03-10
发明(设计)人: 汪洋;冯震;顾娟;吴自荣;黄静;劳勋 申请(专利权)人: 华东师范大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12P21/02;A61K38/17;A61P3/10;C12R1/19
代理公司: 上海金盛协力知识产权代理有限公司 代理人: 董红曼
地址: 200062*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一种具有Exendin-4活性的Exendin-4衍生物的重组制备方法和应用,属于生物工程技术领域。该衍生物的分子结构式为以下的六种结构式:Exendin-4(1-39)-Xaa40(Seq ID No.2),Exendin-4(1-39)-Xaa40-Xaa41(Seq ID No.3),Exendin-4(1-39)-Xaa40-Xaa41-Xaa42(Seq ID No.4),Exendin-4(1-30)-Xaa31(Seq ID No.6),Exendin-4(1-30)-Xaa31-Xaa32(Seq ID No.7)和Exendin-4(1-30)-Xaa31-Xaa32-Xaa33(Seq ID No.8)之一,其中Xaa40,Xaa41,Xaa42,Xaa31,Xaa32和Xaa33分别是Cys,Ala,Gly,His,Ser和Thr中的任何一个氨基酸。采用DNA重组技术制备该衍生物。该衍生物具有长于Exendin-4的半衰期;通过DNA重组技术制备,易于纯化,成本低,特别适合于在制备治疗糖尿病的药物中作该药物的活性成分。
搜索关键词: 一种 exendin 衍生物 重组 制备 方法 应用
【主权项】:
1.一种Exendin-4衍生物的重组制备方法,其特征在于,包括步骤:(1)按Exendin-4衍生物的氨基酸序列合成基因片段;(2)构建含有Exendin-4衍生物编码序列的重组表达载体;(3)用含有Exendin-4衍生物或融合的Exendin-4衍生物基因序列的表达载体转入原核生物的宿主细胞,获得基因工程菌株;(4)将基因工程菌株经液体发酵,离心获得含有Exendin-4衍生物融合蛋白或单独含有Exendin-4衍生物蛋白的湿菌体;(5)将湿菌体破壁,分离获得含Exendin-4衍生物融合蛋白或单独含有Exendin-4衍生物蛋白的粗品;(6)经纯化,冷冻干燥制得Exendin-4衍生物。
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