[发明专利]一种从人脐带血CD34+细胞扩增巨核祖细胞的方法

摘要

本发明公开了一种从人脐带血CD34⁺细胞扩增巨核祖细胞的方法，我们将磁珠分选的脐带血CD34⁺造血祖细胞接种于照射的人骨髓间充质干细胞上，在含有重组人血小板生成素(rhTPO)的无血清培养基中培养7天，通过细胞计数、流式细胞表型检测和巨核细胞集落形成实验(CFU-MK assay)分析扩增巨核祖细胞的效果。采用本发明的方法扩增巨核祖细胞，与现有方法相比，培养条件更接近体内天然的骨髓造血微环境，扩增巨核祖细胞的数量更多，而且间充质干细胞所分泌的细胞因子和添加的rhTPO均符合临床应用的标准。因此，本发明为巨核祖细胞体外扩增提供了一条新途径。

主权项

1、一种从人脐带血CD34+细胞扩增巨核祖细胞的方法，包括以下步骤：(1)分离人脐带血单个核细胞，分选CD34+细胞，检测分选细胞的纯度；(2)分离培养人骨髓间充质干细胞，并对其进行鉴定；(3)用完全培养基重悬接种骨髓间充质干细胞，待细胞生长至大量汇合时，照射细胞，将CD34+细胞重悬于含TPO的无血清培养基中，接种到照射过的骨髓间充质干细胞上进行培养。