[发明专利]一种应用原生动物纤毛虫降解石油的方法

摘要

本发明涉及一种应用原生动物纤毛虫降解石油的方法，其特征包括如下步骤：A.从环境中分离纯化纤毛虫种群；B.纤毛虫种群的驯化；C.驯化后纤毛虫种群对原油的降解；D.绘制纤毛虫种群生长曲线；F.培养7天后测定对照组和实验组原油含量的变化，计算原油降解率。本发明首次发现原生动物四膜虫(Tetrahymena)属、肾形虫(Colpoda)属，对于石油具有很强的降解能力，降解率最高分别可达68.08％和83.06％。并且纤毛虫可以通过光学显微镜观察鉴定种类，分离、纯化步骤简单方便，易于培养，作为石油降解生物，可大大促进石油污染的治理和原油的微生物开采，对生物法石油污染修复极具实用价值。

主权项

1、一种应用原生动物纤毛虫降解石油的方法，其特征包括如下步骤：A、从环境中分离纯化纤毛虫种群：从油污染的水域或土壤中采集原生动物群落，实验室内用麦粒培养液扩群，操作步骤为：显微镜下吸取一只纤毛虫，用麦粒培养液扩大培养，获得纤毛虫的单一种群；B、纤毛虫种群的驯化：上述分离纯化的纤毛虫种群培养液中加如重量比例为0.5％原油，恒温摇床振荡培养，驯化3-5天；C、驯化后纤毛虫种群对原油的降解：实验组在无机盐培养基中加入石油，将石油在培养基中的浓度设置成高、中、低三个梯度，重量体积比分别为0.25％(a)、0.50％(b)、1.00％(c)，每一梯度设三到四个平行，然后加入等量400-600个虫体/ml的处于对数生长期的四膜虫Tetrahymena sp.以及等量麦粒培养液，以麦粒培养液中自然繁殖的细菌和培养液中溶解的营养成分作为四膜虫的食物；对照组中加入等量麦粒培养液作为对照，每组设三个平行；D、绘制纤毛虫种群生长曲线：每隔12小时进行取样观察，并对四膜虫Tetrahymena sp.进行计数，观察四膜虫Tetrahymena sp.的生长状况，绘制其种群生长曲线；F、培养7天后测定对照组和实验组原油含量的变化，计算原油降解率。