[发明专利]β-聚苹果酸及其盐的制备方法

摘要

本发明公开了一种制备β-聚苹果酸及其盐与同时获得副产物普鲁兰多糖的方法。通过下述方案予以实现：发酵过程中利用膜技术回流菌体和截留、浓缩高分子量β-聚苹果酸，使低分子量β-聚苹果酸、普鲁兰多糖及其它成份循环回发酵体系；采用弱碱性阴离子交换树脂，吸附β-聚苹果酸且使普鲁兰多糖溶液透过，采用碱性溶液洗脱树脂上吸附的β-聚苹果酸，洗脱液经提纯、干燥得β-聚苹果酸盐产品；所得渗透液经浓缩，采用氯仿/丁酮混合液去除蛋白，乙醇醇析使普鲁兰多糖沉淀，丙酮、乙醚依次洗涤，P₂O₅干燥得普鲁兰多糖粉末状产品；采用强酸性阳离子交换树脂吸附β-聚苹果酸盐溶液中的盐离子，脱盐溶液经膜脱除多余的酸，浓缩、干燥得β-聚苹果酸产品。

主权项

1. β-聚苹果酸及其盐和普鲁兰多糖的制备方法包括如下步骤：1)接种发酵将出芽短梗霉经活化和种子培养后接种于发酵培养基中，pH4.0～4.5，温度20-28℃，通气量0.5-2.5vvm，培养72-96h，启动泵循环菌体、膜浓缩高分量的β-聚苹果酸及普鲁兰多糖；2)β-聚苹果酸及其盐和普鲁兰多糖的制备(1)将第1)步获得的β-聚苹果酸浓缩液经弱碱性阴离子交换树脂吸附，收集渗透液，用去离子水冲洗树脂，洗水与渗透液合并得溶液C，用碱溶液洗脱吸附在树脂上的β-聚苹果酸，洗脱液经脱色得溶液D，将溶液D浓缩，经有机溶剂沉淀、冷冻干燥或喷雾干燥步骤制得白色β-聚苹果酸盐产品；(2)将(1)所得的溶液D或β-聚苹果酸盐产品溶液，经强酸性阳离子交换树脂吸附，去除β-聚苹果酸盐中的盐离子，渗透液经膜浓缩去除多余的酸根离子，经有机溶剂沉淀、冷冻干燥或喷雾干燥制得白色β-聚苹果酸产品；(3)将(1)所得溶液C用膜浓缩，浓缩液中加入氯仿/丁酮混合液(体积比4∶1)，充分振荡使蛋白析出，离心或过滤除去沉淀。除蛋白的剩余溶液加入2倍体积无水乙醇，充分搅拌，放置12-24h，使普鲁兰多糖沉淀，分离所得沉淀经丙酮、乙醚依次洗涤，P2O5干燥，得普鲁兰多糖粉末状产品。