[发明专利]鱼卵细胞提取物及其在诱导人成体细胞分化为多能干细胞中的应用

摘要

本发明公开一种鱼卵细胞提取物及其在诱导人成体细胞分化为多能干细胞中的应用。杀鱼取卵，经过冻融，离心，过滤、蛋白浓度4毫克/毫升，为卵细胞提取物。从成人全身各个组织获取成熟的体细胞原代细胞或传代二至四后代细胞，用本发明的提取物来诱导成体细胞，使其逆向分化为多能性干细胞，可以为临床提供各种细胞来源，还可以用来治疗各种疾病。与现有技术相比具有不损伤细胞、培养条件简单、无毒、诱导效率高等优点，同时也避免利用基因重组技术存在的安全隐患。

主权项

1、鱼卵细胞提取物，其特征在于，主要由以下方法取得：一、取鱼卵细胞，用生理盐水清洗后置于容器中备用；二、将装有鱼卵细胞的容器放入-80℃至-190℃低温冰箱或液氮中冷冻，待完全冻结后取出，在常温或不高于42℃温水中隔水融化完全，如此冻融，反复3-5次，使卵细胞破碎；三、在冻融处理后的鱼卵细胞中按体积比1∶1加入生理盐水，充分搅均后，离心取得上清液，上清液再经过滤器过滤去除细菌和分子量大于等于20万道尔顿的大分子成份，取得二次上清液，测定并调整蛋白质浓度为4毫克/毫升，4℃保存备用，此为本发明的鱼卵细胞提取物。