[发明专利]大黄鱼精子超低温冻存方法及冻存装置

摘要

本发明公开了大黄鱼精子冻存方法：通过抗冻液配制、精子采集、抗冻液与精液的混合液的配制、混合液分装和混合液冻存等步骤，该方法是一种操作方便，精子存活率较高，精子的保存质量较好，精子冻存后的激活率相对较高的大黄鱼精子超低温冻存方法；本发明还公开了上述方法的冻存装置，包括带盖的泡沫箱，泡沫箱内置有液氮，泡沫箱内深为18厘米，壁厚为2.5厘米，在泡沫箱的两长壁上对称设置有从泡沫箱的箱顶向下的凹槽，凹槽从泡沫箱的箱顶向下的深度为0.5厘米，液氮的液面与凹槽的距离为2.5～3.5厘米；该装置具有操作较方便，避免了开盖后液氮蒸气笼罩现象，节约冻存时间，也避免了麦细管滚动而掉入液氮现象等优点。

主权项

1、大黄鱼精子超低温冻存方法，其特征在于包括下述步骤：1)抗冻液配制：按体积比85～90∶10～15将稀释液与抗冻剂混合均匀，配制成抗冻液置于4℃温度条件下保存待用；2)精子采集：挑选性腺发育成熟的雄性大黄鱼，擦干其生殖孔周围体表，轻压鱼腹获得精液，置于培养皿或小烧杯中，放于冰浴上；3)抗冻液与精液的混合液的配制：按体积比1∶2.5～3.5，将上述步骤2的精液与上述步骤1的抗冻液混合均匀，得到混合液，在4℃温度条件下平衡10～15分钟；4)混合液分装：将平衡后的0.35～0.45毫升混合液装于0.5毫升的麦细管中；5)混合液冻存：将上述步骤4的麦细管搁置于简易盛有液氮的冻存装置的凹槽中，所述凹槽与所述液氮的液面的距离为2.5～3.5厘米，盖上冻存装置的盖保持2.5～3.5分钟，然后开盖将所述麦细管投入所述液氮中，再盖上冻存装置的盖保持4～6分钟，开盖捞出所述麦细管立即转入液氮罐中保存。