[发明专利]卷烟烟气致细胞毒性的测定评价方法

摘要

本发明涉及卷烟烟气毒理学研究领域，尤其是一种卷烟烟气致细胞毒性的测定评价方法。卷烟烟气致细胞毒性的测定评价方法，该方法包括以下的步骤：①卷烟烟气粒相物提取液制取；②HMy2.CIR人B淋巴母细胞系培养；③染毒；④显色；⑤计算细胞存活率；⑥然后绘制成图计算IC50。本发明具有的优点：1、不存在个体差异，可排除个体差异对实验的影响。2、取材方便，细胞数量不受限制，可满足大样本量实验需要。3、不涉及伦理问题。4、与CCK-8作用时间短，可以缩短显色时间并减少因显色时间长而产生的实验误差，实验过程更为快速。

主权项

卷烟烟气致细胞毒性的测定评价方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：①卷烟样品采用吸烟机抽吸卷烟，连续抽吸多支卷烟后将剑桥滤片取出，置于DMSO溶液中，振荡均匀制成卷烟烟气粒相物提取液；②采用HMy2.CIR人B淋巴母细胞系，用含胎牛血清的IMDM培养液于细胞培养箱中培养，2～3天传代一次；③于微孔板中每孔接种2×104～5×104个B淋巴细胞，各受试物分别采用0.001～0.015支烟/ml浓度区间内选择多个浓度的卷烟烟气粒相物提取液进行染毒；④染毒结束后向每孔中加入适量的CCK-8，置培养箱中显色；⑤显色结束后用酶标仪测定吸光度，按照以下公式计算细胞存活率：细胞存活率(％)＝[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100％，其中As为含处理细胞的培养基Ac为含未处理细胞的培养基Ab不含细胞的培养基；⑥然后绘制成图，细胞存活率为50％的受试物浓度值即为IC50。