[发明专利]一种无假阳性T载体及制备方法无效
申请号: | 200910103334.0 | 申请日: | 2009-03-06 |
公开(公告)号: | CN101503698A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | 马跃 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/64 |
代理公司: | 重庆华科专利事务所 | 代理人: | 康海燕 |
地址: | 40071*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于克隆PCR片段的无假阳性T载体及制备,其是一种两个3’端均具有1个突出的dT的线性化质粒载体,所述T载体供插入3’端突出一个dA的PCR片段的位点,即线性化T载体的两个末端,位于阳性克隆筛选标记基因起始密码子与其上游的核糖体结合位点之间。按本发明设计构建的T载体在用于克隆PCR片段时,不会因为T载体自连导致的阳性克隆筛选标记基因移码而产生假阳性克隆。本T载体克服了现有T载体在应用中因载体自连而产生假阳性克隆的技术机制弊端。因此,从技术机制上说(即排除其它实验因素的干扰),本发明设计的T载体应用于T-A克隆时假阳性克隆率为零。 | ||
搜索关键词: | 一种 阳性 载体 制备 方法 | ||
【主权项】:
1、一种无假阳性T载体,其是一种两个3’端均具有1个突出的dT的线性化质粒载体,所述T载体用于T-A克隆时,即使T载体自连也不会因阳性克隆筛选标记基因移码而产生假阳性克隆;其特征在于:所述T载体供插入3’端突出一个dA的PCR片段的位点,即线性化T载体的两个末端,位于阳性克隆筛选标记基因起始密码子与其上游的核糖体结合位点之间。
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