[发明专利]肿瘤多药耐药相关基因的荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 200910103982.6 | 申请日: | 2009-05-27 |
公开(公告)号: | CN101565752A | 公开(公告)日: | 2009-10-28 |
发明(设计)人: | 张鹏辉 | 申请(专利权)人: | 张鹏辉 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400016重庆市渝中*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种肿瘤多药耐药相关基因的荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法,该试剂盒包括以下组成部分:MDR1、MRP1、LRP和内对照GAPDH基因标准品,检测MDR1、MRP1、LRP和内对照GAPDH基因的上、下游引物和荧光探针;该试剂盒的检测方法是先提取待测标本的细胞总RNA,逆转录成cDNA,再与MDR1、MRP1、LRP和内对照GAPDH基因标准品作荧光定量PCR,计算待测标本中MDR1、MRP1、LRP基因的初始拷贝数;本发明能灵敏、特异、准确地同时检测MDR1、MRP1和LRP基因,且操作简单快速,易标准化,检测费用低,适用于肿瘤患者多药耐药的动态监测,可以指导肿瘤化疗用药。 | ||
搜索关键词: | 肿瘤 耐药 相关 基因 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
1、肿瘤多药耐药相关基因的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:包括以下组成部分:a、MDR1基因标准品:含有MDR1基因编码序列的重组载体;b、MRP1基因标准品:含有MRP1基因编码序列的重组载体;c、LRP基因标准品:含有LRP基因编码序列的重组载体;d、内对照GAPDH基因标准品:含有GAPDH基因编码序列的重组载体;e、检测MDR1基因的上、下游引物和荧光探针:MDR1-上游引物:5’-ggaagccaatgcctatgacttta-3’,MDR1-下游引物:5’-gaaccactgcttcgctttctg-3’,MDR1-荧光探针:5’-tgaaactgcctcataaatttgacaccctgg-3’;f、检测MRP1基因的上、下游引物和荧光探针:MRP1-上游引物:5’-caatgctgtgatggcgatg-3’,MRP1-下游引物:5’-gatccgattgtctttgctcttca-3’,MRP1-荧光探针:5’-agaccaagacgtatcaggtggcccac-3’;g、检测LRP基因的上、下游引物和荧光探针:LPR-上游引物:5’-cagctggccatcgagatca-3’,LRP-下游引物:5’-tccagtctctgagcctcatgc-3’,LRP-荧光探针:5’-caactcccaggaagcggcggc-3’;h、检测内对照GAPDH基因的上、下游引物和荧光探针:GAPDH-上游引物:5’-catgagaagtatgacaacagcct-3’,GAPDH-下游引物:5’-agtccttccacgataccaaagt-3’,GAPDH-荧光探针:5’-atcatcagcaatgcctcctgcacca-3’。
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