[发明专利]用于检测人类EGFR基因突变的引物、探针及其使用方法

摘要

本发明公开了用于检测人类EGFR基因突变的引物、探针及使用方法，涉及基因突变的检测。本发明的方法包括(1)提供引物和探针；(2)待测样品处理和模板提取；(3)配制荧光PCR扩增突变基因序列的反应体系；(4)用步骤(1)的引物和探针扩增待测的突变基因靶序列；(5)利用双环探针与扩增产物的杂交，检测反应体系的FAM和HEX或ROX荧光强度作为结果的判断标准。本发明的引物、探针及方法：可同时检测EGFR基因的29缺失突变；灵敏度高；特异性强；选择性能力强；检测速度快，整个检测过程只需要90分钟。

主权项

1、用于检测人类EGFR基因突变的引物及探针，包括下列4组引物和探针中的至少一组：(1)、5′-GAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGC-3′SEQ ID NO：15′-CTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGA-3′SEQ ID NO：25′-CTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGT-3′SEQ ID NO：35′-TCTGGGCTCCCCACCAGAC-3′SEQ ID NO：4FAM-5′-CGTGCCGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGACACCGT-3′-TAMRA SEQ ID NO：21(2)、5′-GTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAAAC-3′SEQ ID NO：55′-GTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAAATATC-3′SEQ ID NO：65′-TCCCGTCGCTATCAAGGATC-3′SEQ ID NO：75′-CCCGTCGCTATCAAGGAGC-3′SEQ ID NO：85′-TCCCGTCGCTATCAAGGAAC-3′SEQ ID NO：95′-TTCCCGTCGCTATCAAGGAATCTT-3′SEQ ID NO：105′-CGGCTGCCAGACATGAGAAAAG-3′SEQ ID NO：11FAM-5′TTCTGCTAAAGCAGAAACTCACATCGAGATGTGA-3′-TAMRA SEQ ID NO：22(3)、5′-GAAGCCTACGTGATGGCCAT-3′SEQ ID NO：125′-GTGGACAACCCCCACCAC-3′SEQ ID NO：135′-CGTGGACAACCCCCACCA-3′SEQ ID NO：145′-ATG GCCAGCGTGGACGGT-3′SEQ ID NO：155′-TGATGGCCAGCGTGTC-3′SEQ ID NO：165′-GAGCAGGTACTGGGAGCC-3′SEQ ID NO：17FAM-5′AGCCGACCTTCGGCTGCCTCCTGGAAGGAGG-3′-TAMRA SEQ ID NO：23(4)、5′TGTCAAGATCACAGATTTTGGGGG-3′SEQ ID NO：185′CAGATTTTGGGCTGGCCAAAAA-3′SEQ ID NO：195′-GGAAAATGCTGGCTGACCTAAAG-3′SEQ ID NO：20FAM-5′-AAGTAAGCCTCCTTACTTTGCCTCCTTCTGCAAGGAGGC-3′-TAMRA SEQ ID NO：24