[发明专利]一种分离猪X精子和Y精子的方法无效
| 申请号： | 200910114268.7 | 申请日： | 2009-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN101613677A | 公开（公告）日： | 2009-12-30 |
| 发明（设计）人： | 卢克焕;曾有权;陆阳清;张明 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 | 代理人： | 刘小萍 |
| 地址： | 530004广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种分离猪X精子和Y精子的方法，该方法的主要操作是：(1)采集公猪精液在30℃±2℃的温度下暂时保存；(2)用精液稀释液按适当比例稀释原精液，然后加入适当浓度的荧光染色剂在水浴锅中闭光孵化染色，再加入食物色素染色后过滤；(3)在20℃～25℃下利用流式细胞仪分离X、Y精子；(4)用装有精子接收液的接收管收集分离后的X、Y精子，再经离心浓缩后可用于保存或授精。采用本发明方法分离猪精子可提高X、Y精子的分辨率和分离准确率，分离准确率90％以上；并有效保持精子的高质量和分离精子回收的高效率，将本发明方法与人工授精和体外授精等繁殖技术结合，可以有效地提高养殖业的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 精子 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分离猪X精子和Y精子的方法，根据猪X精子的DNA含量比Y精子多的原理，通过荧光染料染色后使用流式细胞仪进行分离，其特征是：(1)将采集的公猪精液在30℃±2℃的温度下暂时保存，并尽快进行稀释和分离处理；(2)用不含卵黄、30℃平衡过的精液稀释液按适当比例稀释原精液至精子密度为8～15×107/ml，然后加入适当浓度的荧光染色剂，在适当温度的水浴锅中闭光孵化染色；荧光染色结束后，再加入适量食物色素，在20℃～25℃的温度下染色2min～5min后过滤，其中精液稀释液的成分和含量为：
