[发明专利]一种滇桂艾纳香水溶性多糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种滇桂艾纳香水溶性多糖的制备方法。该方法之一包括：提取、膜分离、脱蛋白、除盐、脱色、精制和精制。该方法之二包括：提取、膜分离、脱蛋白、硅胶柱色谱分离、脱色、透析和精制。本发明具有工艺流程简单、节约能耗、产物纯度较高，质量稳定等优点。特别是本发明产品在凝血复钙实验和小白鼠离体子宫实验中具备显著的止血活性作用。

主权项

一种滇桂艾纳香水溶性多糖的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)提取：将滇桂艾纳香干药材每次加入15倍重量的去离子水或蒸馏水煎煮，共2次，每次3小时，过滤，合并滤液；(2)膜分离：将提取的滤液用中空管状陶瓷微滤膜及中空管状有机超滤膜进行微滤和超滤分离，得到分子量范围在103至104之间的分离液，将该分离液用旋转蒸发仪60℃减压浓缩至0.1g/mL；(3)脱蛋白：在冰浴及搅拌条件下，加入重量浓度为20％的三氯乙酸水溶液，使多糖溶液体系中三氯乙酸的重量浓度达到5％，静置过夜后离心去除植物蛋白沉淀；(4)除盐：离心后的上清液用1mol/L的NaOH溶液中和至pH等于7；减压浓缩至(0.2～0.5)g/mL，冷却至室温后加无水乙醇至溶液中乙醇的浓度为75～80％，在5℃冰箱中静置使盐沉淀，离心分离除去沉淀的三氯乙酸钠盐；将上清液减压蒸干除去乙醇后，用100mL去离子水或蒸馏水溶解；(5)脱色：将上述脱盐及去除乙醇后的多糖溶液，以DEAE阴离子交换柱色谱脱色分离，用去离子水洗脱多糖，收集含糖溶液，减压浓缩至糖含量0.5g/mL，经冷冻干燥得初步纯化的棕黄色絮状粗多糖；(6)精制：将(5)的粗多糖溶于10mL去离子水中，用0.45μm微孔过滤膜减压过滤后，过Sephadex G‑10凝胶色谱分离去除残余的盐份和其他小分子杂质，再利用Sephadex G‑50凝胶色谱进行纯化，以超纯水为流动相，经自动部分接收器定量接收，紫外光谱检测，合并单峰部分溶液，将该溶液减压浓缩 至糖含量0.5～1.0g/mL，经冷冻干燥，获得得精制的滇桂艾纳香水溶性多糖。