[发明专利]一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法

摘要

本发明涉及一种简便测定新鲜禽蛋中卵磷脂含量的分光光度测定方法。该方法的原理将新鲜禽蛋，经过沸水煮制变性后，分离蛋黄与蛋清，然后采用无水乙醚彻底提取蛋黄中的油脂，然后将磷脂转化为无机磷化合物，在酸性条件下生成磷钼酸铵，在被还原为蓝色的钼蓝，在650nm下比色，测定磷含量，最后计算出禽蛋中磷脂含量的方法。对于蛋制品，直接采用此方法可以满足日常实验室分析测定的需要。本发明操作简便，选择性高，去除了禽蛋中无机磷的干扰，测定结果可靠。

主权项

1.一种简便测定禽蛋中卵磷脂的含量的方法，其特征在于：该方法的步骤是：①样品制备：将鲜禽蛋样品首先经过沸水煮制熟透后，冷却分离鸡蛋壳，然后小心分离鸡蛋白和蛋黄，将蛋黄捣碎后加入无水乙醚浸泡，直至将其中的油脂提取干净(使用滤纸检查无油迹为止)，挥干去除无水乙醚后。定量称取样品10-15g左右，然后在电炉上炭化，送至马弗炉内灼烧至完全灰化，取出冷却加入盐酸溶液溶解灰分移入容量瓶中用蒸馏水定容至刻度取此溶液用水稀释至刻度，以此溶液作为试样进行测定。②标准曲线的绘制：取六支10mL具塞比色管，按以下步骤配制标准系列；即在6只10mL具塞比色管中，分别加入10mL、9mL、8mL、6mL、4mL、2mL蒸馏水，再向该组比色管中分别加入0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、8mL磷酸盐标准使用液(相当于0.01mg/mL磷)，分别加入硫酸联氨溶液8mL，钼酸铵溶液2mL。加塞，摇匀后，将比色管放入沸水浴中加热10min，取出冷却至室温，用水稀释至刻度，混匀。放置10min后，用1cm比色皿，在波长650nm处，以试剂空白调整零点，测定吸光度。以吸光度对含磷量(μg)绘制标准曲线。③样品处理与测定：吸取待测样品溶液到50mL具塞比色管中，同②加入处理后，用试样空白调整零点，测定吸光度。④卵磷脂含量计算公式：$X=26.31\×\frac{C}{M}\×\frac{V_1}{V_2}\×{10}^5---\left(1\right)$式中：V1-试样灰化后稀释体积，单位为毫升(mL)；V2-比色时所取测定液体积，，单位为毫升(mL)；M-试样质量，单位为克(g)；C-标准曲线查得的被测液的含磷量，单位为毫克(mg)。X-样品中卵磷脂含量，单位为g/100g