[发明专利]一种用蟾皮微波萃取脂溶性蟾酥的方法

摘要

本发明公开了一种用蟾皮微波萃取脂溶性蟾酥的方法，用乙醇为萃取溶剂，用微波消解加热萃取，用超滤膜过滤后浓缩，用液相色谱技术分离纯化，其萃取温度突破常规，相对较高但仍控制在最低变性温度内，萃取时间较短，少于1小时，因此萃取过程中脂溶性蟾酥变性较少，而萃取率相对较高；液相色谱分离纯化中蟾毒灵、华蟾酥毒精和酯蟾毒配基的保留时间分别为7.594min、10.103min和10.741min，可以较好地分离得到各种脂溶性蟾酥，且得到的蟾毒灵、华蟾酥毒精和酯蟾毒配基纯度高，可以达到99％，杂质少，因此得到的各种脂溶性蟾酥较稳定，不易变性，本发明的脂溶性蟾酥的提取率为17％以上，高的可以达到40％。

主权项

1、一种用蟾皮微波萃取脂溶性蟾酥的方法，其特征在于包括下述步骤：1)在粉碎的蟾皮中加入浓度为55～100％的乙醇，乙醇与蟾皮(干重计)的重量比为5～10∶1，得到蟾皮乙醇液；2)将上述蟾皮乙醇液放入微波消解器中，用功率为400～800W的微波消解加热萃取，萃取温度为61～95℃，萃取时间为10～50min，得到萃取液；3)将上述萃取液用1000KDa超滤膜过滤后浓缩得到滤液；4)将上述滤液用液相色谱仪分离纯化，该液相色谱仪的色谱柱为C18，柱温为40℃，流动相是质量浓度为0.5％，pH值为3.25±0.02，按质量比50∶50配制的磷酸二氢钾-乙腈混合液，进样量为50μl-100μl，流量为20～70mL/min，蟾毒灵、华蟾酥毒精和酯蟾毒配基的保留时间分别为7.594min、10.103min和10.741min，分别收集得到蟾毒灵纯化液、华蟾酥毒精纯化液和酯蟾毒配基纯化液；5)将上述蟾毒灵纯化液、华蟾酥毒精纯化液和酯蟾毒配基纯化液分别或合并后浓缩干燥，得到相应的脂溶性蟾酥。