[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶的制备方法，本发明通过筛选，选择黑曲霉为出发菌株，以106～108cfu/g的接种量接种于麸皮、米糠和氯化氨，按重量百分比90～100％∶0～10％∶1～3％的比例配制而成的固体培养基中，培养基的起始含水量为65～75％，pH5.5～6.5，于25～30℃培养48～80h，检测β-葡萄糖苷酶的活性可达到300～430U/g；本发明采用固态发酵，利用廉价和丰富的农副产品为发酵底物，同时对培养基和培养条件进行优化，使β-葡萄糖苷酶在固体发酵条件下也达到很高的产量，为其产业化发展提供科学依据。

主权项

一种β-葡萄糖苷酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备培养基：包括：(A)制备斜面种子培养基：将皮马铃薯、蔗糖和琼脂加入水中，经121℃灭菌20min，得到斜面种子培养基，其中，皮马铃薯含量为200g/l，蔗糖含量为20g/l，琼脂含量为20g/l。(B)制备固体种子培养基：按照重量1∶1比例将麸皮加入水中，搅拌均匀，经121℃灭菌30min，得到固体种子培养基。(C)制备固体生产培养基：按重量百分比90～100％∶0～10％∶1～3％的比例将麸皮、米糠和氯化氨混合，经121℃灭菌30min，得到固体生产培养基。(2)制备斜面种子：将黑曲霉菌株划线接种在斜面种子培养基上，于28℃恒温培养5d后，得斜面种子。(3)制备种子：将步骤(2)得到的斜面种子种在固体种子培养基中，于28℃下恒温培养72h，得到种子。(4)发酵生产：将步骤(3)所获得的种子以106～108cfu/g固体培养基的接种量，接种到固体生产培养基上，在固体培养基中添加质量百分比为其0.5％的MgSO4·7H2O和质量百分比为其1.5％的KH2PO4，调节培养基的起始含水量65～75％，PH5.5～6.5，于25～30℃培养48～80h，得β-葡萄糖苷酶。