[发明专利]一种海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法

摘要

本发明公开了一种海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，先将原料虾搅碎以料液比1∶1～1∶3加入pH值7-9的tris-HCl缓冲溶液，震荡均匀后高速离心10-30分钟后上清液即为粗酶液；取两试管，试管1中加入pH值7-9的Tris-HCl缓冲液2～4ml和0.004～0.05mol/L L-DOPA溶液1.5～2.5ml，试管2中加入0.8～1.2ml PPO酶液，将两只试管在40-45℃水浴中放置10-20min，立即混匀；在460-520nm波长下进行比色测定，每10～50秒记录一次OD值随时间的变化，测定6-10min，以最初直线段的斜率计算酶活力。本发明的优点在于通过对海捕虾酚氧化酶活性状态的检测，可以选择一种适宜的保鲜剂来对海捕虾进行保鲜，从而达到防腐、防黑变的目的，本检测方法具有简便、快捷、经济的特点。

主权项

一种海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)海捕虾酚氧化酶的制备：将原料虾搅匀制浆，称取一定质量的虾浆，按照料液比1∶1～1∶3加入pH值7‑9的tris‑HCl缓冲溶液，采用震荡仪震荡均匀，2～10℃下静置4～15分钟后，利用高速冷冻离心机以转速8000‑10000r/min离心10‑30分钟，上清液即为粗PPO酶液；2)取试管1和试管2，依次向试管1中加入pH值7‑9的Tris‑HCl缓冲液2～4ml和0.004～0.05mol/LL‑DOPA溶液1.5～2.5ml，向试管2中加入0.8～1.2ml PPO酶液，将两只试管在40‑45℃水浴中放置10‑20min，立即混匀；3)将混合液在460‑520nm波长下进行比色测定，每10～50秒记录一次OD值随时间的变化，测定6‑10min，以最初直线段的斜率计算酶活力。