[发明专利]一种固定化酶法合成茶黄素的方法

摘要

本发明提供了一种固定化酶法合成茶黄素的方法，其步骤包括：采用金属铝板为支撑物经戊二醛联壳聚糖包埋法固定化多酚氧化酶，然后放入0.1％浓度的茶多酚溶液在pH5.0、通气量20L/min条件下，37℃恒温水浴中反应1h，后补料0.1％浓度茶多酚溶液10ml继续反应1h。最后经乙酸乙酯萃取制得茶黄素成品。该法利用生物合成法制茶黄素，相比于茶叶提取茶黄素产量大大提高，反应条件温和，生产成本低，生产过程中无污染，适合工业化生产。

主权项

一种固定化酶法合成茶黄素的方法，其特征包括以下几个步骤：(1)固定化多酚氧化酶的制备用洗净的茶鲜叶，预冷后加入冷丙酮，在捣碎机中捣碎，抽滤到丙酮无色，将滤渣进行低温干燥，得丙酮粉。称取一定量丙酮粉，加入适量的柠檬酸‑磷酸氢二钠缓冲液(pH5.6)和少量石英砂、聚乙烯吡咯烷酮，在冰浴中研磨匀浆，匀浆液在离心机中400t r/min离心10分钟，上清液即为粗酶液。将粗酶液以多孔金属铝板为支撑物，经戊二醛联壳聚糖包埋法制得多酚氧化酶金属酶膜。(2)多酚氧化反应固定化多酚氧化酶酶膜与30ml 0.1％浓度的茶多酚溶液在pH5.0、通气量20L/min条件下，37℃恒温水浴中反应1h，后补料0.1％浓度茶多酚溶液10ml继续反应1h。(3)茶黄素萃取用适量的磷酸二氢钠与等体积乙酸乙酯混合萃取，混合液在80℃水溶液浸提5min，过滤，滤液经减压浓缩，再经三氯甲烷萃取，除去咖啡碱等杂质，然后用磷酸二氢钠和乙酸乙酯混合萃取5次，乙酸乙酯层经减压，冷冻浓缩干燥，粉碎，过筛后得到合格的茶黄素产品。