[发明专利]建立系统性红斑狼疮OAZ基因应用模型的方法无效
| 申请号： | 200910184790.2 | 申请日： | 2009-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN101629213A | 公开（公告）日： | 2010-01-20 |
| 发明（设计）人： | 冯学兵;孙凌云;李荣良;黄静 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙 鸥;吴 澄 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及建立系统性红斑狼疮OAZ基因应用模型的方法。本发明通过采集被测者外周血单个核细胞，提取RNA，逆转录为cDNA，加入引物，进行实时荧光定量PCR以分析OAZ基因的表达水平，分析OAZ基因的表达量与系统性红斑狼疮疾病活动相关性，用OAZ小干扰RNA在体外对培养细胞进行干扰，测定上清液中IFN-γ、IL4、IL10、IL12、IL21、CCL2、ANA浓度，将特异性选择OAZ基因位点作为药物干预靶点，构成系统性红斑狼疮OAZ基因应用模型。本发明克服了对系统性红斑狼疮发病机制研究缺少分析、选择和实验的生物模型的缺陷。本发明可以发现系统性红斑狼疮OAZ基因的表达量与SLE疾病易感性、活动性成正相关，运用RNAi干扰技术，确定药物干预靶点，避免副作用。 | ||
| 搜索关键词： | 建立 系统性红斑狼疮 oaz 基因 应用 模型 方法 | ||
【主权项】：
1.建立系统性红斑狼疮OAZ基因应用模型的方法，其步骤在于：(1)采集并分离被测者外周血单个核细胞，提取RNA，逆转录为cDNA，加入相应的引物，进行实时荧光定量PCR以分析OAZ基因的表达量；(2)用Spearman相关统计软件分析OAZ基因的表达量与系统性红斑狼疮疾病活动相关性；(3)采集并分离患者外周血单个核细胞，用OAZ小干扰RNA在体外对培养细胞进行干扰，然后分离细胞和上清液，从细胞中提取RNA，逆转录为cDNA，用实时荧光定量PCR分析不同分组OAZ信号通路相关基因OAZ表达水平的变化，ELISA法测定上清液中IFN-γ、IL4、IL10、IL12、IL21、CCL2、ANA浓度；(4)将特异性选择OAZ基因位点作为药物干预靶点；(5)构成系统性红斑狼疮OAZ基因应用模型。
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