[发明专利]共表达阴离子配体生产重组阳离子抗菌肽的方法有效
申请号: | 200910185208.4 | 申请日: | 2009-11-02 |
公开(公告)号: | CN101696417A | 公开(公告)日: | 2010-04-21 |
发明(设计)人: | 查向东;周鹏;王作利 | 申请(专利权)人: | 查向东 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12P21/02;C12N15/81;C12R1/19 |
代理公司: | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 230039 安徽省合*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种共表达阴离子配体生产重组阳离子抗菌肽的方法,是在表达阳离子抗菌肽的同时,共表达一个独立的带净负电荷的阴离子配体,即将阳离子抗菌肽基因与编码阴离子配体的DNA序列克隆至质粒载体,在大肠杆菌宿主细胞内独立非融合表达,通过阴离子配体来抑制阳离子抗菌肽对宿主细胞的毒性,提高表达产量,而在后续的分离纯化中,避免了切割融合头这一耗费人力、物力、财力的步骤,提高分离纯化的效率与得率。本发明能够显著缩短生产周期至原先的三分之一或二分之一,提高产量,降低成本50%以上。本发明为阳离子抗菌肽的大规模生产提供一条高效低成本途径。 | ||
搜索关键词: | 表达 阴离子 生产 重组 阳离子 抗菌 方法 | ||
【主权项】:
共表达阴离子配体生产重组阳离子抗菌肽的方法,其特征在于:在基因工程生产阳离子抗菌肽的过程中,同时表达一个独立的阴离子配体,所述的阴离子配体是一段带净负电荷的氨基酸序列;也就是将阳离子抗菌肽基因与编码阴离子配体的DNA序列克隆至质粒载体,在大肠杆菌宿主细胞内诱导共表达;表达得到的阴离子配体可抑制阳离子抗菌肽对宿主细胞的毒性;阴离子配体与阳离子抗菌肽之间是非融合的,无共价键连接。
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