[发明专利]早幼粒细胞白血病PML蛋白单克隆抗体的制备及应用无效
申请号: | 200910187803.1 | 申请日: | 2009-10-10 |
公开(公告)号: | CN102041258A | 公开(公告)日: | 2011-05-04 |
发明(设计)人: | 吴芬芳;陈立勇;王华颖 | 申请(专利权)人: | 大连美亿德生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/63;C12N1/00;C12N1/21;C07K14/435;C07K16/18;G01N33/577;C12R1/19 |
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地址: | 116025 辽宁省大连市大连*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开一种可特异性识别人早幼粒细胞白血病蛋白(PML蛋白)的单克隆抗体的制备方法,属于生物基因工程和医学领域。本发明选择了PML蛋白锌指结构域中“ring finger”结构区的一段氨基酸序列,通过分子克隆的方法将其在大肠杆菌中表达。涉及:从人粒细胞白血病细胞系(HL60)中,通过RT-PCR方法获得一段PML基因,将其克隆入pET32a载体中,在大肠杆菌中表达PML蛋白,将此重组蛋白经酶切和纯化后免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术获得杂交瘤细胞株,将杂交瘤细胞接种至小鼠腹腔,制备腹水,从腹水中提纯抗人PML单克隆抗体。该单克隆抗体可特异性识别人PML蛋白,可用于检测PML-RARα融合蛋白,为急性早幼粒细胞白血病的诊断提供帮助,并能指导其临床预后判断和治疗方案的选择。 | ||
搜索关键词: | 粒细胞 白血病 pml 蛋白 单克隆抗体 制备 应用 | ||
【主权项】:
一种DNA序列,其特征在于它由如下核苷酸序列组成: 1 gaggaggagttccagtttctgcgctgccagcaatgccaggcggaagccaagtgcccgaag 61 ctgctgccttgtctgcacacgctgtgctcaggatgcctggaggcgtcgggcatgcagtgc121 cccatctgccaggcgccctggcccctaggtgcagacacacccgccctg 168
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