[发明专利]红法夫酵母菌株的复合诱变方法

摘要

本发明一种红法夫酵母菌株的复合诱变方法，首先红法夫酵母菌株两次紫外诱变，得到一株五代内遗传性状稳定的突变株，然后又将此突变株低温处理。经低温处理的突变株，又经过单线态氧诱变处理，得到一株在10代内有良好的遗传稳定性的突变株。将突变株发酵培养，测定其生物量和色素含量，均高于原始菌株。本发明通过低温复合诱变得到一株虾青素产量较高的红法夫酵母诱变菌株，为下一步红法夫酵母工业化生产奠定基础。

主权项

一种红法夫酵母菌株的复合诱变方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、取红法夫酵母种子培养液，稀释后涂平板；S2、一次紫外诱变：在黑暗环境下，用紫外灯照射平板后，在20-25℃下培养4-5天；S3、二次紫外诱变：筛选色素产量高且遗传稳定的菌株，重复涂平板及步骤S2；S4、低温处理：筛选色素产量高且遗传稳定的菌株，制得种子液，保存于1-5℃环境下2-4天；S5、单线态氧处理：将所述种子液转移到发酵培养基中培养至对数生长中后期，提取菌株的单细胞状态，分别加入浓度为10-15mmol/L的H2O2，振荡混匀后置于1-5℃环境中培养10-18小时；S6、单线态氧处理后的菌株，经洗涤、稀释后涂平板在20-25℃下培养7-10天。