[发明专利]提高细菌基因表达的活化因子

摘要

本发明涉及一种提高细菌基因表达的活化因子。该激活因子主要用于提高细菌基因组中目的产物的提高。该活化因子基因分离于Comamonas testosteroni一种革兰氏阴性细菌的染色质DNA。该基因含有564bp。首先将280bp的tac启动子DNA片段克隆到质粒pK18的BamHI酶切位点中，在tac启动子下游再插入564bp的活化因子基因蛋白，从而构建成为质粒pKtac-act5。pKtac-act5含有卡那霉素抗性基因，并可在多数革兰氏阴性菌中复制。利用该质粒pKtac-act5可提高细菌基因表达。使工程菌的目的产物的表达水平(5-50倍)。采用了本质粒pKtac-act5可有效的提高微生物分解化学有害物质的能力，生物工程制药。也可有效的提高石油裂解菌群的石蜡液化能力，从而提高石油产量。

主权项

本发明是通过基因筛选和重组得到一种质粒pKtac-act5，其主要特征在于提高细菌基因表达。构建的质粒pKtac-act5，将280bp的tac启动子DNA片段和一个564bp的活化子基因片段克隆到质粒pK18中获得本活性质粒。本质粒含有卡那霉素抗性基因，同时该质粒可在多数革兰氏阴性菌中复制。在不能复制的细菌中该质粒可整合到细菌染色质DNA中使细菌具有卡那霉素抗性标志，从而达到筛选工程菌株的目的。1.本质粒pKtac-act5基因全序列为：CGCGCAGTGCACTTCCACAGCATCGAAGTTGGCCTGCTTGGCGCGCAGGGCGGCCGCAGCAAACCATTCCACCATCTGTGCAATATCGGCCTTGTCCATCACGCGGTAGCGGTCGGGGTAGGGGCCAATCCCCACAAAGGTCGAGAATTCCTTGGGCGTGACGGTGCGCATGGCTTCGGCCACAGGACCGTCGGGCGGAATCGAGGACACCCACATCTCGCGCCCGTGGGTGCGGTCATTGGCAGCGACCTTGCCGCTGTGATTGATCTGGATGGCGACTTTGCCGCCGTGCGAGTGAACGCGGCGCGTGACTTCGGCCAGACCGGGGATGAAGCTGTCGTTGGAGATGCCCAGTTGGTGCGGCTCGCTGGTGCCGGTGGGCCAGGAGATGGCGGCCGTGCCCATGATGATGAGGCCGGTGCCGCCCTTGGCACGCTCTTCGTAATAGTCCTGGGCGCGTTCGCCGCAGATACCGTCGGTGCCGCCGTAGTTCTCGCCCATGGGGGCCATGATGATGCGGTTCTTCAGCTCCATGGTGCCGATACGGCCCGGCTGCAGCATTGA对上述全基因序列(564bp+TGA)具有知识产权保护。