[发明专利]一种分离、纯化许旺细胞的方法无效
| 申请号： | 200910195923.6 | 申请日： | 2009-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN102021140A | 公开（公告）日： | 2011-04-20 |
| 发明（设计）人： | 祝加学;沈尊理;秦金保;沈华;张兆峰 | 申请（专利权）人： | 上海市第一人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 20008*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种分离、纯化许旺细胞的方法。该方法依次由下述步骤组成：首先，无菌情况下取神经段，去除神经外膜；然后用复合胶原酶NB4和dispase混合消化酶溶液消化神经束，弃溶液；再置于胰蛋白酶和EDTA中作用5～10分钟，得到去除神经束膜的神经纤维；随后将得到的神经纤维置于混合酶溶液中，振荡得到细胞混悬液；最后离心，重悬。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的许旺细胞，为损伤神经修复提供丰富优质许旺细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 纯化 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种分离、纯化许旺细胞的方法，其特征是该方法包括下述步骤：(1)无菌情况下取神经段，去除神经外膜；(2)用3～5倍组织量的复合胶原酶NB4和dispase混合消化酶溶液消化神经束10～20分钟，弃溶液；(3)将步骤(2)得到的神经束，置于37℃温浴的质量体积比0.1～0.25％胰蛋白酶‑0.02％EDTA作用5～10分钟，得到去除神经束膜的神经纤维；(4)将步骤(3)得到的神经纤维置于步骤(2)中所述混合酶溶液中，置于37℃，摇床中振荡30～60分钟，得到细胞混悬液；(5)以600g离心5～10分钟，弃去上清，用许旺细胞培养液重悬。
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