[发明专利]一种汽雾式菌根真菌的生产方法及生产设备

摘要

本发明涉及一种汽雾式菌根真菌的生产方法及生产设备，设备包括生长箱及喷雾喷头、喷雾控制器、营养液供给装置组成，喷雾喷头置于生长箱内的营养液供给管道上，营养液供给管道在生长箱的底部穿孔后进入到生长箱下面的营养液供给箱内与其底部的潜水泵相连；生长箱底部开有营养液的回流孔，通过管道与营养液箱内的回流管相连。将接种菌丝的寄主植物架在空中，利用根系下部的喷头每隔数秒对根系喷雾营养液，菌根真菌在植物根部生长，并产生孢子。由于改善寄主根系和菌丝的通气、避免了土壤微生物对根系的污染，易获得纯净真菌繁殖体，最终每克干重根所产生的混合物含孢子数平均为6000个，适合工业化大规模生产。

主权项

一种汽雾式菌根真菌的生产方法，其特征在于包括如下步骤：(1)、宿主植物的选择选取的宿主植物为白喜草(Paspalum notatum Flugge)；(2)、菌根真菌的菌种选用选用包括Glomus intraradices，Glomus aggregatum，Glomusmosseae三种混合丛枝菌根真菌的繁殖体的菌剂，每克菌根真菌的混合物有150个孢子；(3)、白喜草与菌根真菌共生生长时用的营养液，即气雾营养液的配方为：母液： 每升营养液所用的量(mL/L)0.01M KH2PO4 0.31.00M KNO3 1.51.00M Ca(NO3)2.4H2O 1.51.00M MgSO4.7H2O 0.30.1M NaCl 0.30.1M NaFeEDTA 0.45微量元素 1.0控制pH在6.0到6.8之内；其中微量元素的组成如下：46.20mM H3BO39.53mM MnCl2.4H2O0.765mM ZnSO4.7H2O0.32mM CuSO4.5H2O0.066mM Na2MoO4.2H2O(4)、培养环境气雾式生长箱放在有35％的遮阴网的温室内，温室的温度范围是26～37℃，最高的光合作用光线强度(photosynthetic photonflux density PPDF)为1100μmoles/s/m2；(5)培养步骤①、宿主植物的培养在128穴孔的园艺穴盘内装上蛭石，置于温室生长床上，用水浇透，每穴孔播种十粒白喜草草种，每天取，含量为20％氮肥，五氧化二磷含量为20％，氧化钾含量为20％的混合型水溶性肥料按其与水的质量体积比0.5g/L溶于水后进行施肥，每天浇水一次，让百喜草在穴盘内生长14天；②、宿主植物与菌根真菌的共生培养14天后，把百喜草从穴孔中拿起，取1克含有菌根真菌的混合物与每穴孔的百喜草根部混合，用上述的营养液在穴盘中继续生长28天，28天后，用Trypan Blue法来确定百喜草的根有菌根真菌共生，再把有菌根真菌共生的百喜草用1mm厚2cm宽的海绵布把百喜草的根茎部包起，插入预先放置好白喜草与菌根真菌的生长箱盖上孔内，进行培养；培养开始后，通过控制汽雾式菌根真菌的生产方法所用的设备的喷雾控制器，控制汽雾开启的时间，控制营养液的每天上午五点到下午八点开启，每1min喷雾10s，每两周更换营养液，更换后的营养液在培养时，每天检测营养液中的pH与EC值，保证pH为6.2，保持EC在0.8～2.0，否则也要更换营养液；③、菌根真菌的收获生长箱上培养21天以后，开始采收菌根真菌，采收时，让喜草的根部留10cm长，其余的部分用剪刀剪下，将根与菌根真菌一起晒干后切成0.5cm的碎段，每克干重根所产生的混合物含孢子数平均为6000个，与矽藻土按重量比为1∶40的比例混合后装袋，混合后的孢子数为每克150个；④、收获后菌根真菌的保藏与矽藻土混合好的菌根真菌样品存放在4℃的冷藏库内备用。