[发明专利]冬虫夏草菌的固体发酵法

摘要

本发明公开了一种冬虫夏草菌的固体发酵法。本法采用生产菌种为中国被毛孢Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu et Zeng的液体发酵醪液作液体菌种，通过灌注或拌和接种，让冬虫夏草菌在以谷物为基质的固体培养基上发酵生产。本法综合了液体发酵和固体发酵的双重优点。既有菌种培养时间短、活力强、流动性好、发育点多的优点，又具有生产设备投资小、能耗低、无废液排放、产品易贮存等特点。本发明的终产品，为富含冬虫夏草菌的谷物。可直接作为保健食品的原料应用。

主权项

一种冬虫夏草菌的固体发酵法，其特征在于该方法包括下列步骤：一、液体菌种生产(1)菌种：生产菌种为中国被毛孢Hirsutella sinensis Liu，Guo，Yu etZeng；菌种经DNA指纹谱鉴定，与天然冬虫夏草的相似率为95％-100％；(2)液体菌种生产：①液体母种的培养：取在14～18℃下培养2-3月的中国被毛孢菌苔，切成小块，移入盛有100ml液体培养基的250ml锥形瓶中，在转速为80～200rpm的旋转式或往复式摇瓶机上振荡培养，培养温度为14～18℃，2～3周后，即可获得冬虫夏草菌的液体母种；②液体菌种的扩大生产：将冬虫夏草菌的液体母种，移植到2～3倍量v/v的液体培养基中，继续在温度为14～18℃，转速为80～200rpm的旋转式或往复式摇瓶机上振荡培养6～8天，即得冬虫夏草菌的液体菌种；所述液体培养基由碳源、氮源、矿物质、复合营养成分、维生素和水组成；其中碳源为下列一种或多种成分：蕈糖、蜂蜜、糖蜜和葡萄糖，含量为2.0～4.0％w/v；氮源为下列一种或多种成分：蛋白胨、酵母浸出粉、蚕蛹粉或奶粉，含量为0.1～3.0％w/v；矿物元素为磷酸二氢钾、磷酸氢二钾或硫酸镁，含量为0.01～0.1％w/v；复合营养成分为下列一种或多种成分：菇蕈、米麸、麦麸、玉米，含量为1.0～10.0％w/v；维生素为硫胺素，含量为0.001～0.01％w/v；水为饮用水，含量为83～97％w/v；液体培养基的pH值为6.0～7.0；二、固体发酵生产：(1)固体发酵的培养基：固体发酵的培养基由谷物、辅料和水组成；所述谷物为大米、小米、玉米、小麦、大麦或荞麦的一种或多种，含量为固体发酵培养基的35～40％w/w；辅料为下列一种或多种：蚕蛹粉、麦麸或玉米粉，含量为固体发酵培养基的5～15％w/w；水为饮用水，含量为固体发酵培养基的50～55％w/v；(2)灭菌：将上述固体发酵培养基装入容器内，在1.1KG/cm2下蒸汽灭菌30～60分钟；(3)接种：将步骤一所得的冬虫夏草菌液体菌种，灌注入上述已经灭菌並冷却的固体发酵培养基中，接种量为固体发酵培养基干重的10～50％v/w；(4)发酵培养和采收：冬虫夏草菌的固体发酵培养，其室温控制在12～18℃，料温控制在14～18℃，相对湿度在65±10％，经8～12周发酵培养后，培养物表面的菌丝体色泽由白色转为黄褐色，这時发酵培养已成熟，即可取出作冷冻真空干燥；(5)冷冻干燥：冬虫夏草菌的固体发酵培养物，可用冷冻真空干燥法干燥，干燥物经粉碎、过筛，即得冬虫夏草菌的固体发酵菌粉。