[发明专利]一种鉴定康氏木霉纤维素酶系中差异蛋白组分的培养基及其用途

摘要

本发明提供一种用于康氏木霉(Trichoderma koningii)生产纤维素酶系的培养基。还提供一种利用所述的培养基在不同的代谢控制条件下分离并鉴定康氏木霉纤维酶系的差异蛋白的方法，包括培养康氏木霉菌株以生产纤维酶系的差异蛋白、采用变凝胶梯度双循环电泳来分离纯化纤维素酶系各组分差异蛋白的单一样品、对所得的活性差异蛋白进行功能鉴定，以鉴定所得的差异蛋白组分是否属于β-葡萄糖苷酶、外切酶或内切酶。本发明作用在于提供一种新的纤维素酶系分类法，对传统的纤维素酶系分类提出挑战，为深入研究该菌株的基因组学和蛋白质组学提供理论依据，同时为微生物多酶体系的分离纯化提供具体可行方案。

主权项

一种用于康氏木霉(Trichoderma koningii)生产纤维素酶系的培养基，包括(1)诱导培养基：碳源为稻草粉、甘蔗渣或秸秆，氮源为麸皮、酵母膏、蛋白胨、硫酸铵或氯化铵，水20ml，其中稻草粉作为诱导物；(2)阻遏培养基：葡萄糖0.5-10g，碳源为稻草粉、甘蔗渣或秸秆，氮源为麸皮、酵母膏、蛋白胨、硫酸铵或氯化铵，水20ml，其中葡萄糖作为阻遏物；其中碳源和氮源质量以确保物质所含的碳元素：氮元素量之比为10～30∶1；由于在诱导培养基中，诱导物可诱导康氏木霉分泌了大量的纤维素酶，而阻遏培养基中含葡萄糖，作为纤维素酶酶解纤维素的最终产物，葡萄糖通过末端产物阻遏纤维素酶酶系的分泌，使得康氏木霉直接利用环境中的葡萄糖，供给自身生长繁殖的需要。