[发明专利]一种利用程序温度调控的繁茂膜海绵组织人工培养的方法

摘要

本发明涉及一种利用程序温度调控的繁茂膜海绵组织人工培养的方法，通过人工构建温控系统，打破了海绵生长受季节温度变化的影响，将海绵在自然海域的季节性增长模式变为人工可控条件下的连续增长模式，考察了海绵在生长周期内的生物量变化，组织形态变化和内部结构变化。本发明为海绵外植体反应器培养提供了一套完整的温度调控方法，为进一步通过可控条件下的代谢调控让海绵体内活性物质过量表达成为可能，为海绵外植体反应器培养和细胞生产生物硅质材料的研究提供了新颖而全面的对象体系。

主权项

一种利用程序温度调控繁茂膜海绵组织人工培养的方法，其特征在于：可按如下步骤操作：(1)繁茂膜海绵的预处理：取处于复苏期的繁茂膜海绵，将海绵表面泥沙和附着生物除去、洗净后，室温条件下，放入海绵缸中预养，暂养过程使用沙滤天然海水，暂养6‑9天，每2‑3天换水1次；(2)繁茂膜海绵的固定和基本培养条件：选取质量在1‑4g的健康洁净的繁茂膜海绵组织，采用“十字法”用细线将海绵组织固定在玻璃培养皿的表面；将固定好的海绵放入玻璃缸中，沙滤天然海水养殖，每10升的沙滤天然海水中可放置总持量为10‑20g的海绵组织，通过气泵充空气，喂食金藻，无阳光直射的自然光照条件下，一周换水2‑3次；程序温度调控方法：从开始培养时起将沙滤天然海水的温度设定为15‑17℃，每隔两天上调0.8‑1.2℃，直至24‑26℃后维持8‑12天；之后每隔两天下调0.8‑1.2℃，一直降到15‑17℃；之后每天降1.8‑2.2℃，一直降到0‑2℃，完成了繁茂膜海绵的一个自然条件下一年的生长周期。