[发明专利]一种工业废水降解微生物菌株的培养方法

摘要

本发明提供了一种工业废水降解微生物菌株的培养方法，属于生物技术领域。它解决了现有的用于降解工业废水的菌株降解作用单一，对复合污染物不具降解能力的问题。本工业废水降解微生物菌株的培养方法，包括以下步骤：配制含不同浓度梯度的目标化合物的液体培养基；获取分别以苯胺或硝基苯化合物为唯一碳源和氮源，以苯酚为唯一碳源的含质粒菌株；驯化培养和进行质粒及降解能力鉴定；纯化获得含质粒的工业废水降解微生物菌株。本发明的培养方法工艺流程简单，使用原料的成本较低，培养的菌株对复合污染物具有降解能力，对工业废水中的苯胺、苯酚和硝基苯类化合物降解效率较高。

主权项

一种工业废水降解微生物菌株的培养方法，该方法包括以下步骤：A、针对工业废水中的苯胺、苯酚和硝基苯类化合物，分别配制含不同浓度梯度的目标化合物的液体培养基，其中苯胺和硝基苯类化合物以其为唯一的碳源和氮源，苯酚另外添加氮源，所述的液体培养基中还添加微生物菌株生长所需要的其它化学基质成分，将部分液体培养基转化成选择性固体培养基；B、将工业废水中的活性污泥加入到牛肉膏蛋白胨液体培养基中进行富集，然后接种到含不同浓度梯度的目标化合物的液体培养基进行驯化培养，培养温度为15-45℃，培养时间6-25天，反复驯化培养2-12次，将驯化培养的菌株涂布于选择性固体培养基进行平板划线分离，并进行质粒抽提，获取分别以苯胺或硝基苯化合物为唯一碳源和氮源，以苯酚为唯一碳源的含质粒菌株；C、将假单胞菌株接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中进行富集，富集后将其制成感受态细胞，将步骤B中得到的三种质粒菌株和所述的感受态细胞重悬于LB液体培养基，在温度为10-40℃的条件下孵育10-45小时；再加入到含不同浓度梯度的三种目标化合物的液体培养基进行驯化培养，驯化培养温度为15-45℃，驯化培养时间6-25天，反复驯化培养2-12次，驯化培养后涂布于选择性固体培养基，在温度为10-40℃的条件下孵育10-45小时，然后进行质粒及降解能力鉴定；D、将步骤C中获得菌株进行纯化后，即获得含质粒的工业废水降解微生物菌株。