[发明专利]一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法

摘要

本发明提供一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法，以竹叶为原料，经粉碎、浸泡、回流提取、冷却、离心、减压脱溶、再经柱纯化、减压脱溶等步骤得到竹叶黄酮提取物，得到的竹叶黄酮提取物含有黄酮化合物、可溶性总糖、蛋白质、粗脂肪、水分、矿物质等，具有显著的抗氧化、清除自由基、降压降血脂的作用，可广泛应用于食品、保健品、化妆品及清洁用品中。该工艺使用乙醇-水体系，实现了无污染操作，同时，黄酮提取率较高，纯度及抗氧化活性亦较高。

主权项

一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法，其特征在于：(1)称取粉碎至20目的竹叶粉于圆底烧瓶中，在所述的圆底烧瓶中加入60％的乙醇溶液形成竹叶粉乙醇溶液，所述竹叶粉质量与所述60％的乙醇溶液体积的比值范围为1∶10至1∶8，所述竹叶粉质量单位为克，所述60％的乙醇溶液体积单位为毫升，所述60％的乙醇溶液事先用6M盐酸调pH值至3-4；(2)将所述竹叶粉乙醇溶液室温放置2小时，使竹叶粉得到充分的浸泡，得到浸泡后的竹叶粉乙醇溶液；(3)将所述浸泡后的竹叶粉乙醇溶液在电热套中加热至沸腾，加热回流3小时后，将竹叶粉乙醇溶液冷却至35-40℃，倾倒出乙醇溶液，倾倒过程尽量不要将竹叶粉倒出，此乙醇溶液为乙醇第一次提取液；(4)将倾倒出所述乙醇第一次提取液后剩余的竹叶粉残渣再加入60％的乙醇溶液，所述竹叶粉质量与所述60％的乙醇溶液体积的比值范围为1∶5至1∶6，其中60％的乙醇溶液体积单位为毫升，所述竹叶粉质量单位为克，所述的60％乙醇溶液用6M盐酸调pH至3-4，加热回流2小时，将竹叶粉乙醇溶液冷却至35-40℃，倾倒出乙醇溶液，倾倒过程尽量不要将竹叶粉倒出，此乙醇溶液为乙醇第二次提取液；(5)将所述乙醇第一次提取液和所述乙醇第二次提取液混合，得到乙醇提取液，将乙醇提取液采用高速冷冻离心机离心除沉淀，所述高速冷冻离心机的转速为每分钟8000转，在20℃的情况下离心30分钟，得到上清液；(6)将所述上清液在旋转蒸发仪上进行浓缩，脱除溶剂，其中所述旋转蒸发仪真空度为0.09Mpa，水浴温度控制在50-55℃之间，脱除溶剂至脱溶瓶中剩余30％体积溶液，得到浓缩液；(7)将所述浓缩液慢慢倒入内装树脂的层析柱，所述的层析柱其特征在于事先用蒸馏水洗至流出液清亮，所述的树脂其特征在于是HP-20大孔吸附树脂，控制上样流速为1.5mL/min，1kg竹叶提取后得到的浓缩液对应1kg树脂，即树脂与竹叶的质量之比为1∶1。(8)依次用50％乙醇水溶液及95％乙醇水溶液上柱洗脱杂质，控制流速2mL/min，用硅胶GF254薄层板在线监控洗脱过程，最后用100％乙醇洗脱产品，收集100％乙醇流出液；(9)将所述的100％乙醇流出液在旋转蒸发仪上将乙醇脱出干净，旋转蒸发仪真空度0.09Mpa，水浴温度控制在50-55℃，得竹叶黄酮提取物。