[发明专利]一种提高法夫酵母细胞内虾青素含量的法夫酵母培养方法

摘要

本发明涉及一种提高法夫酵母虾青素含量的法夫酵母培养方法。该方法包括法夫酵母野生菌株JCM9042菌种固体种子制备、一级种子培养、二级种子培养与发酵培养以及发酵液的虾青素含量测定。本发明的培养方法使用麦角甾醇合成抑制剂，可明显地促进法夫酵母中虾青素的积累，与不使用麦角甾醇合成抑制剂相比，本发明的培养方法能够提高虾青素的含量高达3-8倍以上。本发明的方法简单易行，麦角甾醇合成抑制剂及培养基成本低廉，有效地降低虾青素的生产成本，有利于工业化培养。

主权项

一种提高法夫酵母细胞内虾青素含量的法夫酵母培养方法，其特征在于该方法的步骤如下：A、PDA固体斜面培养基配制如下：200g马铃薯经洗净去皮切碎后，加水1000ml煮沸半个小时，用纱布过滤，其滤液再加20g葡萄糖，混匀后用去离子水补充液体体积至1000ml，在温度115℃下灭菌15分钟，得到PDA液体培养基，往该PDA液体培养基中加入15g琼脂，待琼脂溶解、凝固后得到PDA固体培养基；B、配制种子培养基：将36-44g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、2.0-2.8g尿素、1.6-2.2g磷酸二氢钾、0.4-0.6g硫酸镁七水合物溶解于蒸馏水，定溶至1000ml，调节pH至5.8-6.2；C、配制发酵培养基：将100-120g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、0.4-0.8g尿素、1.6-2.2g磷酸二氢钾、0.4-0.6g硫酸镁七水合物溶解于蒸馏水，定溶至1000ml，调节pH至5.8-6.2；D、培养条件与方法(1)种子制备：将含有法夫酵母野生菌株JCM9042的菌液涂布在步骤(A)制备的PDA固体培养基平板上，在温度20-23℃下进行斜面培养70-80小时，然后置于温度3-5℃下保存；(2)一级种子培养：从上述(1)得到的法夫酵母野生菌株JCM9042固体斜面上挑取菌苔接种入所述种子培养基中，在温度20-23℃及摇床振荡速度180-220rpm下培养3-4天；(3)二级种子培养：上述(2)得到的一级种子以种子培养基体积计按照8-12％接种量加到所述的种子培养基中，在温度20-23℃与振荡速度180-220rpm下培养34-40小时；(4)发酵培养：上述(3)得到的二级种子以发酵培养基体积计按照4-8％接种量加到所述的发酵培养基中，在温度20-23℃与振荡速度180-200rpm下培养14-18小时，加入麦角甾醇合成抑制剂，再接着培养88-112小时，得到法夫酵母野生菌株JCM9042的发酵液。