[发明专利]液相色谱分离制备中药附子中主要酯型生物碱的方法

摘要

本发明涉及一种液相色谱分离制备中药附子中主要酯型生物碱的方法，本发明在分析色谱基础上采用线性放大并优化，建立制备色谱，对中药附子中主要酯型生物碱进行分离制备，从中药附子中分离制备6个单酯型二萜类生物碱和3个双酯型二萜类生物碱，其中6个单酯型生物碱是首次分离得到，纯度均达99.3％以上，所述的分析色谱及制备色谱的色谱柱中的固定相均为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相均为有机相-醋酸盐缓冲体系，所述的有机相占流动相比例为20～70％，有机相为甲醇或乙腈，所述的醋酸盐缓冲体系为醋酸铵-醋酸缓冲体系，检测波长为230～240nm，用流动相溶解并稀释中药附子总生物碱粗提物作为分析色谱和制备色谱的供试品。

主权项

一种液相色谱分离制备中药附子中主要酯型生物碱的方法，从中药附子中分离制备主要酯型生物碱，在分析色谱基础上采用线性放大并优化，建立制备色谱，对中药附子中主要酯型生物碱进行分离制备，其特征在于：在所述的分析色谱及制备色谱中，色谱柱中的固定相均为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相均为有机相-醋酸盐缓冲体系，所述的有机相占流动相比例为20～70％，有机相为甲醇或乙腈，所述的醋酸盐缓冲体系为醋酸铵-醋酸缓冲体系，检测波长为230～240nm，用流动相溶解并稀释中药附子总生物碱粗提物作为分析色谱和制备色谱的供试品，其中，分析色谱中，供试品以流动相溶解、稀释成质量浓度为0.6～1.2g·mL-1，进样体积为10～30μL，流动相流速为0.4～1.0mL·min-1；制备色谱中，进样浓度为0.8～1.0g·mL-1，至少进样量为分析色谱进样量乘以相应线性放大系数，其中，线性放大系数按下式计算：Sf＝π(Dp)2/π(Da)2＝(Dp/Da)2式中：Sf为线性放大系数；Dp为制备色谱柱内径；Da为分析色谱柱内径；供试品经制备色谱分别收集得到的各主要酯型生物碱流分，先以15～30℃温度旋转蒸发浓缩，后以冷冻干燥机冷冻干燥制得。