[发明专利]农杆菌介导小麦遗传转化体系的完善及转基因研究

摘要

小麦是世界上最重要的粮食作物之一，小麦品种的遗传改良工作始终受到科学家的广泛关注。农杆菌介导的小麦遗传转化是最具潜力的一种转基因方法，多年来人们一直致力于影响转化率各个因素的研究。本实验以22个小麦成熟胚及6个小麦幼胚为材料，进行外植体愈伤组织诱导及分化再生的研究，优化小麦外植体再生体系。在此基础上采用农杆菌介导的方法对小麦外植体愈伤组织进行遗传转化，并对影响遗传转化效率的因素进行研究，完善农杆菌介导的小麦遗传转化体系。结果表明，基因型是影响小麦外植体愈伤组织形成和分化再生的重要因素；接种菌液浓度及侵染时间、共培养条件等因素，对小麦外植体愈伤组织遗传转化效率有较大影响；获得的转基因小麦再生植株，为小麦遗传转化研究及转基因后代的遗传分析奠定坚实的基础。

主权项

农杆菌转化植物细胞是通过将其体内的一段T‑DNA转移到被侵染的植物细胞而实现的。农杆菌附着到植物伤口组织上后，通过二者间的相互作用，农杆菌可形成纤维素小纤丝将其固定在植物细胞壁上，同时诱导受伤的植物组织释放一些酚类化合物，如乙酰丁香酮(AS)，羟基乙酰丁香酮(AS‑OH)等，这些酚类化合物就作为信号分子，从而激活其它Vir基因的转录，并激活根癌带有目的基因片段的T‑DNA插入愈伤组织的染色体中。由于农杆菌侵染植物是一个互相作用的过程，在对农杆菌感染植物过程本身因子的转录与调控有一定认识的时候，一些研究也注意了被感染植物细胞中有关的分子过程。