[发明专利]一种制备环孢菌素A的方法

摘要

本发明属生物医药技术领域，提供了一种工业化制备高纯度环孢素A的方法，经发酵液提取、非极性大孔吸附树脂层析、硅胶柱层析、结晶纯化得环孢菌素A，本发明采用等浓度洗脱，没有复杂的中间步骤溶剂置换过程，工艺操作简捷，适于工业化生产，纯度大于98.5％，收率为65％以上。

主权项

一种从发酵液中分离纯化环孢菌素A的方法，其过程包含以下步骤：(1)环孢菌素A的提取向发酵液中加NaOH调PH值为中性，加入有机溶剂，搅拌提取5～8小时，将提取液滤出菌体收集滤液；(2)大孔吸附树脂层析大孔吸附树脂装柱，对树脂进行预处理，提取液上样，用洗涤剂处理上样后的树脂，然后洗脱液洗脱并收集洗脱液，加入石油醚萃取洗脱液，将萃取液浓缩待用；(3)硅胶柱层析硅胶装柱，将萃取浓缩液上样，用丙酮石油醚混合溶剂洗脱，收集纯度合格的环孢菌素A洗脱液；(4)结晶纯化洗脱液真空浓缩并结晶，用丙酮洗涤，最后真空干燥得无色粉末状环孢菌素A纯品。