[发明专利]一种结核分枝杆菌的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种结核分枝杆菌的试剂盒及其检测方法。包括兔抗结核分枝杆菌的多克隆抗体，酶标孔板，生物素标记单链DNA适配子，辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素及其显色底物。利用该试剂盒，将多克隆抗体包被酶标孔板，加入结核分枝杆菌或待检痰液及对照样品，经反复洗涤，未结合的细菌被洗去，再用生物素标记的单链DNA适配子捕获，加辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，加入底物显色，显色终止后，在酶标仪的吸收波长上测其OD值。本发明主要检测结核分枝杆菌，或痰、血液和体液中的结核分枝杆菌或菌体抗原，适用于所有医院。检测速度快，方便安全，省时效率高，而且价格低廉，检测灵敏度和精确度都很高，应用前景广阔。

主权项

一种结核分枝杆菌的试剂盒，该试剂盒包括：抗结核分枝杆菌的多克隆抗体，酶标板，生物素标记核酸适配子NK2，辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素及其显色底物；所述的生物素标记核酸适配子NK2的制备：将NK2序列合成，合成生物素标记NK2的5’端为：bio‑NK2，并用无菌双蒸水稀释为100nM，200nM，400nM的浓度，‑20℃保存；所述的抗结核分枝杆菌的多克隆抗体的制备：将结核分枝杆菌H37Rv加热60℃30分钟灭活，用PBS配成1x109CFU/ml，按1mg＝1x107CFU换算，耳静脉注射入家兔，连续7天，每天注射一次，第7天注射后一周，心脏取血，1000rpm离心分离血清，即为抗结核杆菌标准毒株H37Rv的抗血清，保存于‑80℃。