[发明专利]通过淀粉和木聚糖的降解酶的表达开发能进行淀粉和木聚糖的醇发酵的耐热酵母多形汉逊酵母菌株

摘要

在多形汉逊酵母中克隆和表达了来自酵母西方许旺酵母的分别编码α-淀粉酶和葡糖淀粉酶的基因SWA2和GAM1。通过将SWA2基因和GAM1基因与多形汉逊酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(HpGAP)的强组成型启动子可操作地连接后整合入多形汉逊酵母的染色体中而实现该表达。所得转化体获得在包含可溶性淀粉作为唯一碳源的基本培养基上生长的能力，并可在高温发酵下由淀粉生产乙醇，高达10g/L。编码木聚糖内切酶的XYN2基因是从真菌里氏木霉获得，并且编码β-木糖苷酶的xlnD基因是从真菌黑曲霉获得。在HpGAP启动子的控制下通过将这些基因整合入多形汉逊酵母染色体中还实现这些基因的共表达。所得转化体能够在补充桦木木聚糖作为唯一碳源的基本培养基上生长。木聚糖降解酶的成功表达得到能够在48℃将桦木木聚糖发酵为乙醇的受体菌株。另外上述基因在过表达丙酮酸脱羧酶基因的多形汉逊酵母菌株中的共表达进一步提高乙醇生产量。

主权项

一种多形汉逊酵母(H.polymorpha)菌株，所述多形汉逊酵母菌株包含编码α‑淀粉酶的至少一种基因和编码葡糖淀粉酶的至少一种基因，所述基因与在所述多形汉逊酵母菌株中表达所述基因的至少一种启动子可操作地连接，并且所述酶以充足的量自所述多形汉逊酵母菌株输出到培养基中，从而允许所述多形汉逊酵母菌株在只含可溶性淀粉作为碳源的培养基中生长。