[发明专利]通过实时聚合酶链反应的核酸分析方法及实施该方法的装置

摘要

本发明涉及分子生物学、医学和生物技术，特别是涉及聚合酶链反应方法和利用反应产物累积的实时记录来实施该方法的装置。本发明要克服的问题使用通过实时聚合酶链反应测定核酸的方法和相应的装置而得以解决，所述方法包括：将含有核酸的液体样品引入微芯片的导热衬底的上表面上的反应区域中；将所引入的样品与大气隔离；在通过微芯片的外表面来除热的情况下，在样品的热循环过程中将样品中的核酸与聚合酶链反应的成分接触；在热循环过程中对聚合酶链反应产物的量的变化进行荧光检测；通过荧光信号生长的动力学鉴定样品中初始核酸量，其中，所使用的微芯片包含由导热系数高于1W/cm·K且热扩散系数高于0.6cm2/s的导热材料制成的导热衬底，同时微芯片表面上的反应区域通过共价连接于导热衬底表面的钝化材料层与导热衬底隔开，并且所引入的样品通过由与水不混溶的液体层(其借助外围挡板保持在导热衬底的上表面上)将其与大气分开而被隔离，带有所引入的样品和与水不混溶的液体层的微芯片的总蓄热量与微芯片衬底的导热率之比不超过0.04s。技术效果是分析用时缩短，分析的可靠性、精确度、效率和成本效益得到提高。

主权项

一种通过实时聚合酶链反应鉴定核酸的方法，所述方法包括：将含有核酸的液体样品引入微芯片的导热衬底的上表面上的反应区域中；将所引入的样品与大气隔离；在通过所述微芯片的外表面来除热的情况下，在所述样品的热循环过程中将所述样品的核酸与所述聚合酶链反应的成分接触；在热循环过程中对所述聚合酶链反应产物的量的变化进行荧光检测；通过荧光信号的生长的动力学鉴定所述样品中初始核酸量，其中，所述微芯片与导热系数高于1W/cm·K且热扩散系数高于0.6cm2/s的所述导热衬底一起使用，同时所述微芯片表面上的所述反应区域通过共价连接于所述导热材料表面的钝化材料层与所述导热衬底隔开，而所述引入的样品通过由与水不混溶的液体层将其与大气分开而被隔离，所述液体层借助外围挡板保持在所述导热衬底的上表面上，带有所引入的样品和所述与水不混溶的液体层的所述微芯片的总蓄热量与所述微芯片衬底的导热率之比不超过0.04s。