[发明专利]利用内部校正定量检测RNA

摘要

本发明涉及一种定量样品中一种或多种靶核糖核酸的方法，包括以下步骤，(i)提供包含所述一种或多种靶核糖核酸的样品，(ii)在允许所述染料与所述样品中的一种或多种核糖核酸结合的条件下，使所述样品与核糖核酸特异性荧光染料接触，(iii)检测所述样品中所述RNA-结合染料的荧光值，(iv)将所测得的荧光值与样品中的RNA总量相关联，(v)逆转录所述一种或多种核糖核酸，从而产生双链核酸，(vi)扩增所述一种或多种产生的双链核酸，其中在扩增期间和/或之后，在允许样品中产生的所述一种或多种双链核酸结合所述一种或多种探针的条件下，存在所述一种或多种扩增产物的一种或多种特异性荧光探针，(vii)检测扩增期间和/或之后，结合于所述一种或多种扩增产物的所述一种或多种探针的荧光值，并将所测得的荧光值与样品中靶RNA序列的含量相关联，(viii)按样品中RNA的总量校正样品中靶RNA序列的含量。

主权项

检测样品中一种或多种靶核糖核酸的方法，包括以下步骤：(i)提供包含所述一种或多种靶核糖核酸的样品；(ii)在允许所述染料与所述样品中一种或多种核糖核酸结合的条件下，使所述样品与核糖核酸特异性荧光染料接触；(iii)测定所述样品中所述RNA‑结合染料的荧光；(iv)将所述测得的荧光与样品中的RNA总量相关联；(v)逆转录所述一种或多种核糖核酸，从而产生双链核酸；(vi)扩增所述一种或多种产生的双链核酸，其中在扩增期间和/或之后，在允许一种或多种探针与样品中产生的所述一种或多种双链核酸结合的条件下，存在所述一种或多种扩增产物的一种或多种特异性荧光探针；(vii)测定扩增期间和/或之后结合于所述一种或多种扩增产物的所述一种或多种探针的荧光，并把所述测得的荧光与样品中靶RNA序列的量相关联；(viii)按样品中RNA的总量校正样品中靶RNA序列的含量。