[发明专利]使用双链核酸特异性染料在固体表面上的实时多重PCR检测

摘要

本发明提供使用对双链核酸特异性的染料允许在一个反应中实时检测大量感兴趣的靶核酸（多重）的方法。

主权项

监控一种或多种靶核酸的扩增的方法，其包括以下步骤：a. 提供具有大量核酸捕获探针被固定化在其表面上的基片，其中各个所述核酸捕获探针互补于靶核酸，不同的同一性的核酸捕获探针在空间上彼此分离；b. 向所述基片中加入一种或多种靶核酸的样品和聚合酶链式反应中核酸扩增所需的另外的试剂，所述另外的试剂包含正向和反向引物以及至少一种能够与双链核酸特异性地相互作用的染料；c. 通过包括热循环的过程扩增所述一种或多种靶核酸，所述过程包括以下步骤：       i. 使所述一种或多种靶核酸变性；       ii. 使所述正向和反向引物与所述一种或多种靶核酸的变性链的各自链退火；       iii. 延伸所述退火的正向和反向引物；d. 将步骤c.i中变性的一种或多种靶核酸与所述核酸捕获探针杂交，任选地伴随延伸步骤c.ii；e. 通过测定从至少一种能够与双链核酸特异性地相互作用的染料中产生的信号来检测所述一种或多种靶核酸与所述捕获探针的杂交。