[发明专利]一种集胞藻PCC6803表达外源基因的方法有效
申请号: | 201010034404.4 | 申请日: | 2010-01-15 |
公开(公告)号: | CN102127563A | 公开(公告)日: | 2011-07-20 |
发明(设计)人: | 吕雪峰;齐凤霞;谈晓明;罗全 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/13;C12R1/89 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 周长兴 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 一种集胞藻PCC6803表达外源基因的方法,包括:1)分别将集胞藻6803的rbcL启动子(Prbc,1.3kb)和终止序列rbc terminator(Trbc,0.2kb),2kb的壮观霉素抗性标记基因Ω,以及报告基因lacZ构建于一个集胞藻6803基因组整合质粒平台,得到已经包含报告基因的用于集胞藻6803表达外源基因并可以基因组整合的平台质粒pFQ20;2)pFQ20转化集胞藻6803藻株,经壮观霉素抗性筛选得到转化子,用特异引物PCR鉴定基因型后,测定转化了表达平台和外源基因的基因工程集胞藻6803藻株的β-半乳糖苷酶酶活,以验证集胞藻6803外源基因表达平台的表达效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 集胞藻 pcc6803 表达 基因 方法 | ||
【主权项】:
一种集胞藻PCC6803表达外源基因的方法,主要过程包括:1)分别将集胞藻6803的rbcL启动子(Prbc,1.3kb)和终止序列rbcterminator(Trbc,0.2kb),2kb的壮观霉素抗性标记基因Ω,以及报告基因lacZ构建于一个集胞藻6803基因组整合质粒平台,得到已经包含报告基因的用于集胞藻6803表达外源基因并可以基因组整合的平台质粒pFQ20;2)pFQ20转化集胞藻6803藻株,经壮观霉素抗性筛选得到转化子,用特异引物PCR鉴定基因型后,测定转化了表达平台和外源基因的基因工程集胞藻6803藻株的β‑半乳糖苷酶酶活,以验证集胞藻6803外源基因表达平台的表达效率。
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