[发明专利]用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白有效
| 申请号： | 201010103631.8 | 申请日： | 2010-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN101759798A | 公开（公告）日： | 2010-06-30 |
| 发明（设计）人： | 陈付国;毕丹;曹谊林;张文杰;刘伟;崔磊 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学医学院附属第九人民医院;陈付国 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N9/90;C12N5/071 |
| 代理公司： | 上海信好专利代理事务所(普通合伙) 31249 | 代理人： | 姜玉芳 |
| 地址： | 200011*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其采用以下步骤获得：真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；对上述所得的单克隆细胞进行成脂肪、成骨及成神经体外诱导，并鉴定其分化能力；分别对双向克隆细胞和三向克隆细胞分离提纯，获得相应的膜蛋白组分；通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；进行LTQ质谱分析，获得匹配的蛋白质；通过Western-Blot检测，找出标志膜蛋白。本发明还涉及所述的标志膜蛋白的用途，经上述方法初步筛选出的随着分化能力的变化而出现较明显上调或下调的标志膜蛋白，可用于具有多向分化潜能细胞的分选纯化。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 纯化 富集 真皮 多向 分化 潜能 细胞 标志 膜蛋白 | ||
【主权项】：
用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其特征在于，所述的标志膜蛋白采用以下步骤获得：步骤1，真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；步骤2，对上述步骤1得到的单克隆细胞进行多向诱导，并鉴定其分化能力；步骤3，以膜蛋白提取液分别提取双向克隆细胞和三向克隆细胞的膜蛋白，获得相应的膜蛋白组分；步骤4，上述步骤3获得的膜蛋白，通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；步骤5，通过质谱分析，获得与上述的差异蛋白点相匹配的蛋白质结果；步骤6，通过Western-Blot检测上述匹配的蛋白质，找出呈现阳性的标志膜蛋白。
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