[发明专利]二羟基丙酮激酶的原核表达载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201010117331.5 | 申请日： | 2010-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN101845452A | 公开（公告）日： | 2010-09-29 |
| 发明（设计）人： | 陈丽梅;肖素勤;孙振;张婧 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/54;C12N9/12;C07K16/40 |
| 代理公司： | 昆明今威专利代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650093 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明提供一种巴斯德毕赤酵母DAK的原核表达载体(pET28a-DAK)，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点和DAK基因及一个组氨酸标签，从巴斯德毕赤酵母中克隆出DAK基因，用T7启动子控制它在大肠杆菌中的表达，利用该载体转化大肠杆菌(BL21)实现DAK蛋白的高水平表达。表达的重组蛋白质大部分为可溶性蛋白，占大肠杆菌可溶性总蛋白50％，用亲和层析很容易从大肠杆菌可溶性总蛋白中纯化出高纯度的重组DAK蛋白质，用于DAK抗体的制备或生化特性分析。DAK重组蛋白表达量很高，不需要大规模培养细菌，纯化DAK蛋白的操作相当简单，成本也很低，极易重复使用。 | ||
| 搜索关键词： | 羟基 丙酮 激酶 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种原核表达载体，含有巴斯德毕赤酵母的DAK基因。
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