[发明专利]多功能穿梭载体new pBE2 及其构建方法以及利用该载体构建碱性蛋白酶突变库的方法无效
| 申请号： | 201010130089.5 | 申请日： | 2010-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN102229942A | 公开（公告）日： | 2011-11-02 |
| 发明（设计）人： | 路福平;黎明;梁晓梅;王春霞;成堃 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12R1/125;C12R1/07 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 王来佳 |
| 地址： | 300457 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种多功能穿梭载体new pBE2及其构建方法以及利用该载体构建碱性蛋白酶突变库的方法，主要结构为LB-P43-SP-MCS-RB；其构建的主要步骤是将pBE2载体大片段分别与P43强启动子、SP的扩增产物连接，并引入BamHI酶切位点；构建碱性蛋白酶突变库的主要方法是将嗜碱芽孢杆菌碱性蛋白酶基因成熟肽片段连入new pBE2，然后转化大肠杆菌，获得阳性克隆，再将阳性克隆转化到枯草芽孢杆菌WB600中，然后进行几轮高通量筛选。本发明提供的构建碱性蛋白酶突变库的方法使得碱性蛋白酶基因突变的针对性增强，针对碱性蛋白酶成熟肽部分进行突变，大大减少了碱性蛋白酶定向进化研究的工作量。 | ||
| 搜索关键词： | 多功能 穿梭 载体 new pbe2 及其 构建 方法 以及 利用 碱性 蛋白酶 突变 | ||
【主权项】：
一种多功能穿梭载体new pBE2，其特征在于：其结构包括：LB‑P43‑KpnI‑SP‑MCS‑RB。
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