[发明专利]一种大规模生产猪蓝耳病病毒的方法无效
申请号: | 201010135139.9 | 申请日: | 2010-03-30 |
公开(公告)号: | CN101831412A | 公开(公告)日: | 2010-09-15 |
发明(设计)人: | 张许科;孙进忠;乔荣岑;陶家权;骆爱芳;张海洋;习向锋;李三 | 申请(专利权)人: | 洛阳普莱柯生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N7/04 | 分类号: | C12N7/04;C12N7/02;C12R1/93 |
代理公司: | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人: | 韩登营 |
地址: | 471003 河南省洛*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种大规模生产猪蓝耳病病毒的方法,利用生物反应器,以细胞微载体悬浮培养系统生产猪蓝耳病病毒,将制备病毒用宿主细胞接种到含有培养液与微载体的载体罐,并将上述细胞与微载体混合均匀,使细胞贴附在微载体上;在适当培养环境下,提供上述细胞足够的养分和适宜的气体环境,使细胞在上述微载体上生长至接种浓度的5~40倍;换用细胞维持培养液,将蓝耳病病毒制成病毒悬液,使其吸附到上述细胞上;在适当培养环境下培养病毒;连续培养2~3日后,收获病毒液;经检验合格后,将收获的病毒液于-20℃冻融两次,灭活纯化得到蓝耳病病毒液。该方法生产规模大、单批次产量高、生产成本相对较低。 | ||
搜索关键词: | 一种 大规模 生产 猪蓝耳病 病毒 方法 | ||
【主权项】:
一种大规模生产猪蓝耳病病毒的方法,利用生物反应器,以细胞微载体悬浮培养系统生产猪蓝耳病病毒,包括下列技术步骤:(1)培养制备病毒用细胞将可增殖蓝耳病病毒的细胞系接种到含有培养液与微载体的载体罐,并将上述细胞与微载体混合均匀,启动贴附程序,使细胞贴附在微载体上;切换细胞培养程序,在适当培养环境下,提供上述细胞足够的养分和适宜的气体环境,使细胞在上述微载体上生长至接种浓度的5~40倍;(2)毒液的接种与繁殖待细胞达到一定密度时,换用细胞维持培养液,将蓝耳病病毒制成病毒悬液,使其吸附到上述细胞上;在适当培养环境下培养病毒;连续培养2~3日后,收获病毒液;(3)经检验合格后,将收获的病毒液于-20℃冻融两次,灭活纯化得到蓝耳病病毒液。
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