[发明专利]多花筋骨草再生体系建立及快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种多花筋骨草再生体系及快速繁殖方法的组织培养方法，属于植物离体繁殖成苗技术领域，为以植物蜕皮激素类似物为目标产物的细胞或组织培养技术奠定良好的基础。所述培养基为MS培养基，pH值为5.8～6.5。分别以该培养基为原料掺入6-BA 1mg，NAA 0.2mg配成芽诱导培养基。掺入6-BA1mg，2，4-D 0～1mg配成诱导愈伤培养基。掺入6-BA 0～2mg配成腋芽增值培养基。掺入IBA(NAA)0～1mg配成生根培养基。选取叶片经过无菌处理诱导培养，30～35d即可萌发生长出健壮的新芽，再经过25～30d的增殖培养，25～30d的生根培养后即可成苗，移栽，成活率达95％以上。本发明提供的多花筋骨草组培快繁方法，针对多花筋骨草的特点，简便易行，组培苗无畸形，繁殖系数提高，繁殖周期短，培养效果好，成活率高。

主权项

一种多花筋骨草再生体系的建立及快速繁殖方法，其特征在于：所述方法的具体步骤包括：(1)取材方法：选取多花筋骨草的叶片作为外植体进行接种。(2)培养基的配制：在基本培养基MS中分别添加激素：BA，2，4-D，NAA或IBA中的几种，分别配制成芽诱导培养基，丛生芽诱导培养基，愈伤诱导培养基和生根培养基，所述这些培养基PH值为5.8，培养基厚度为1.1～1.5cm。(3)芽诱导培养：选择叶片，将叶片切成1cm×1cm大小，接种在所述的芽诱导培养基上。培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500～2000Lx，诱导培养的时间为30～35d。(4)愈伤诱导培养：选择叶片，将叶片切成1em×1cm大小，接种在所述的愈伤培养基上。培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500～2000Lx，诱导培养的时间为30～35d。(5)增殖培养：将经过步骤3)和4)诱导培养的诱导芽和愈伤组织切成0.5cm长的小块，接种在所述的增殖培养基上培养，培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500～2000Lx，丛生芽诱导培养的时间为25～30d。(6)诱导生根培养：将经过步骤5)诱导长大的丛生芽分成单株，转移到所述的生根培养基中培养。培养条件为：培养温度：25±2℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500～2000Lx，生根培养的时间为25～30d。(7)小苗移栽：当试管苗长至有4～6条根，7～9片叶子，叶长1.5～2cm时，完成多花筋骨草再生体系的建立及快速繁殖方法。