[发明专利]一种包含HLZ乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞有效
申请号: | 201010143538.X | 申请日: | 2010-04-09 |
公开(公告)号: | CN101892263A | 公开(公告)日: | 2010-11-24 |
发明(设计)人: | 武志强;张涌;孙达权 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/877;C12R1/91 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种包含HLZ乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞,通过构建HLZ乳腺特异性表达载体,在HLZ基因的5′端插入如CSN5序列,3′端插入所示的CSN3序列作为调控元件,CSN5序列和CSN3序列对其下游的目的基因具有调控作用,使其在牛乳腺组织中实现特异的高效表达。本发明使用电穿孔的方法将表达载体pCSN2-HLZ-Neo-TK转染到牛胎儿成纤维细胞,再经G418,GVC双药物筛选后获得阳性细胞,以阳性细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚,并进行PCR鉴定其基因整合的正确性,再将转基因克隆胚移入受体牛子宫中,期望获得乳腺组织分泌溶菌酶的转基因奶牛。 | ||
搜索关键词: | 一种 包含 hlz 乳腺 特异性 表达 载体 胎儿 纤维 细胞 | ||
【主权项】:
一种HLZ乳腺特异性表达载体,包含目的基因HLZ,其特征在于,分别在HLZ基因的5′端插入如SEQ.ID.NO.2所示的CSN5序列,3′端插入如SEQ.ID.NO.3所示的CSN3序列,作为调控元件。
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