[发明专利]快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法有效
| 申请号： | 201010149123.3 | 申请日： | 2010-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN101845434A | 公开（公告）日： | 2010-09-29 |
| 发明（设计）人： | 籍月彤;宋厚辉;徐健 | 申请（专利权）人： | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号： | C12N15/01 | 分类号： | C12N15/01;C12R1/01;C12R1/145 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 周长兴 |
| 地址： | 266101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法，主要步骤如下：1)将野生型菌株在含有乙醇的液体培养基中连续培养，定向进化嗜热厌氧产乙醇微生物的乙醇耐受性；2)对耐受乙醇的菌株进行甲基磺酸乙酯诱变，将诱变后的菌液涂布到含有乙醇的固体培养基上；3)待形成单菌落后，选择菌落半径大的单菌落滴加2，3，5-三苯基氯化四氮唑显色液，取显色颜色深的单斑到含有高底物浓度的CaCO3复筛平板上进行复筛；4)选择菌落半径大但透明圈半径小的菌落，滴加pH指示剂排除假阳性；5)发酵后用气相色谱或乙醇定量试剂盒测定乙醇浓度，选择乙醇产量高的菌株在非选择条件下培养至少20代，仍能保持高乙醇产量的菌株即为目的菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 筛选 嗜热厌氧产 乙醇 微生物 高产 菌株 方法 | ||
【主权项】：
一种快速筛选嗜热厌氧产乙醇微生物高产乙醇菌株的方法，主要步骤如下：1)将野生型菌株在含有乙醇的液体培养基中连续培养，定向进化嗜热厌氧产乙醇微生物的乙醇耐受性；2)对耐受乙醇的菌株进行甲基磺酸乙酯诱变，将诱变后的菌液涂布到含有乙醇的固体培养基上；3)待形成单菌落后，选择菌落半径大的单菌落滴加2，3，5-三苯基氯化四氮唑显色液，取显色颜色深的单斑到含有高底物浓度的CaCO3复筛平板上进行复筛；4)选择菌落半径大但透明圈半径小的菌落，滴加pH指示剂排除假阳性；5)发酵后用气相色谱或乙醇定量试剂盒测定乙醇浓度，选择乙醇产量高的菌株在非选择条件下培养至少20代，仍能保持高乙醇产量的菌株即为目的菌株。
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