[发明专利]一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法

摘要

一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，它涉及一种筛选生物破乳菌的方法。它解决了现有生物破乳菌破乳效能低，筛选技术滞后，筛选方法针对性差、操作复杂、时间长、筛选效率低的问题。方法：1.富集培养活性污泥中的目的菌，得菌液；2.菌液分离培养得菌株；3.制备全培养液；4.测定排开油圈的直径，取直径d≥3.0cm的菌株；5.制备全培养液；6.向O/W型乳状液中加全培养液进行破乳，选取排油率≥50%的菌株，即完成。本发明将初筛破乳菌时间从大于3个月降低至1个月，筛出率可达到100%，破乳能力高于50%的菌株，进一步驯化培养则可得到破乳能力高于80%的高效菌株，针对性强，操作简单易。

主权项

一种从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法，其特征在于从活性污泥中快速筛选生物破乳菌的方法按以下步骤进行：一、向装有150ml液体无机盐培养基的三角瓶中接种活性污泥，在温度为28～30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养7d，得富集菌液，然后转接到新鲜的液体无机盐培养基中，在温度为28～30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养7d，重复转接3次，得菌液；二、采用蓝胶平板培养基或油平板培养基对菌液进行划线分离培养，培养条件为倒置于28～30℃的生化培养箱中培养48～72h，然后挑取阳性单菌落进行划线纯化培养，直至得到菌落及菌体形态一致的菌株；三、将菌株接种于装有100ml液体无机盐培养基的三角瓶中，在温度为30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养3d，得全培养液；四、将0.2ml经过油红O染色的煤油滴加到有30ml蒸馏水且直径为10cm的培养皿中，煤油膜铺开稳定后，再向煤油膜表面滴加20μl全培养液，静止30s后测定排开油圈的直径，选取直径d≥3.0cm的菌株；五、将步骤四中所得菌株接种于装有100ml液体无机盐培养基的三角瓶中，在温度为30℃、摇床转数为140r/min的条件下培养3d，得全培养液；六、向装有5mLO/W型乳状液的磨口具塞比色管中加入2mL步骤五中所得全培养液，震荡后静止，在室温下进行破乳，24h后选取排油率≥50%的菌株，即完成从活性污泥中快速筛选生物破乳菌；其中步骤一中活性污泥按体积比为25%的量接种。