[发明专利]一种鉴别免疫动物感染A型流感病毒的抗体间接免疫荧光试验方法无效
| 申请号： | 201010151344.4 | 申请日： | 2010-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN101833002A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 邵卫星;李一经;孙庆杰;魏荣;葛俊伟 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学;中国动物卫生与流行病学中心 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;C12N15/44;C12N15/866;C12N7/01;C07K14/11 |
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| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种鉴别免疫动物是否感染A型流感病毒的抗体间接免疫荧光试验方法。该方法是用昆虫杆状病毒表达A型流感病毒NA蛋白作为抗原，建立抗体间接免疫荧光试验方法，检测A型流感病毒NA蛋白血清抗体。表达的蛋白可直接作为抗原，不需要纯化。本发明建立的方法是A型流感病毒“标记”疫苗的配套检测方法，用于鉴别接种了A型流感“标记”疫苗的动物，如禽、猪等是否感染相应亚型流感病毒；作为一种筛选方法，该方法可用于临床血清样品检测，判定接种了A型流感“标记”疫苗的动物，如禽、猪等是否感染相应亚型流感病毒，以便尽早采取相应的防控措施，有利于根除和消灭临床上流行的相应A型流感病毒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 免疫 动物 感染 流感病毒 抗体 间接 荧光 试验 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴别免疫动物感染A型流感病毒的抗体间接免疫荧光试验方法，包括如下步骤：(1)采集接种了A型流感“标记”疫苗的动物的血液，分离血清，并用PBS溶液稀释；(2)表达NA基因的重组杆状病毒接种昆虫细胞，并表达NA基因；(3)将步骤(1)中稀释的禽血清加入到步骤(2)中表达NA蛋白的昆虫细胞上，室温作用一段时间；(4)用PBS溶液漂洗，然后加入适量FITC标记的兔抗鸡二抗，室温作用一段时间；(5)用PBS溶液漂洗，然后加入适量碳酸甘油缓冲液，在荧光显微镜下观察是否有荧光出现；(6)根据观察的结果判断动物是否感染相应亚型流感病毒。
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