[发明专利]一种污泥中痕量雌激素含量的检测方法

摘要

本发明涉及一种污泥中痕量雌激素的检测技术，特别是涉及污泥样品中痕量雌酮和17β-雌二醇含量的检测方法。本方法将采集好的污泥样品进行冷冻干燥，添加NaN3并采用丙酮振荡萃取后，进行快速溶剂萃取，合并上述萃取液，采用固相萃取柱浓缩富集其中的雌激素，采用乙酸乙酯将雌激素从固相萃取柱上洗脱下来，利用液相色谱-串联质谱联用分析雌激素浓度。该方法环境友好、易于操作、且回收率较高，能够快速分析污泥样品中痕量雌酮和17β-雌二醇的含量。

主权项

一种污泥中痕量雌激素含量的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)污泥样品预处理取1g经冷冻干燥后污泥样品，加入0.5mL 1.5×10-3mol/L的NaN3溶液，搅拌均匀后风干；向上述干燥后的污泥样品中加入10mL丙酮振荡30min后，在2000rpm下离心30min，收集上清液，重复两次；离心后的污泥样品风干后，采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取剂为丙酮，其溶剂量为120-140mL，萃取液与上述两次振荡离心后的上清液合并混匀得到提取液；所采用的快速溶剂萃取条件为：温度60℃，压力1500pis，静态提取2次，各8min；Waters公司的HLB固相萃取柱的活化顺序为：5mL色谱纯乙酸乙酯、5mL色谱纯甲醇及10mL超纯水，流速为1mL/min；取50mL上述提取液加入1000mL蒸馏水后混匀，采用已活化的固相萃取柱对该混合液进行固相萃取富集，控制流速为3mL/min；萃取结束后真空抽干HLB柱5min，以去除水分；利用2×3mL乙酸乙酯洗脱HLB柱，洗脱液收集于10mL玻璃离心管中，控制流速为1mL/min，洗脱液在氮气流下缓慢吹干，加入200μL乙腈/水(v/v)＝1∶1，漩涡混合，冷藏待测。(2)利用液相色谱-串联质谱联用分析雌激素浓度色谱柱：Nova-Pak C18，3.9mm×150mm×4μm；梯度洗脱：采用甲醇和pH＝10的氨水为流动相，甲醇的比例在0-1.2min内由15％升到70％，1.2-2.0min内升到90％，2.0-3.0min内升到98％，3.0-6.1min维持在98％，6.1-6.2min内降至15％，6.2-10min内维持在15％，以上百分比均为体积百分比；(3)标准曲线的绘制，以外标法进行定量测定(4)样品的测定采集待测污泥样品，按步骤(1)对污泥样品进行预处理，再按步骤(2)进行液相色谱-串联质谱联用检测，并与步骤(3)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测污泥样品中雌激素的含量。