[发明专利]一种土壤环境中痕量天然及合成雌激素含量的检测方法

摘要

本发明涉及一种土壤中痕量天然及合成雌激素的检测技术，特别是涉及一种采用液相色谱-串联质谱联用技术对土壤样品中痕量天然和合成雌激素含量的检测方法。本方法将采集好的土壤品进行冷冻干燥，采用丙酮进行快速溶剂萃取，得到萃取液，采用固相萃取柱浓缩富集其中的雌激素，采用乙酸乙酯将雌激素从固相萃取柱上洗脱下来，利用液相色谱-串联质谱联用分析雌激素浓度。该方法环境友好、易于操作、且回收率较高，能够快速分析土壤样品中痕量天然和合成雌激素的含量。

主权项

一种土壤环境中痕量天然及合成雌激素含量的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)土壤样品预处理取5g经冷冻干燥后土壤样品，采用快速溶剂萃取仪进行萃取，萃取剂为丙酮，其溶剂量为120‑140mL，所采用的快速溶剂萃取条件为：温度60℃，压力1500pis，静态提取2次，各8min。Waters公司的HLB固相萃取柱活化的顺序为：5mL色谱纯乙酸乙酯、5mL色谱纯甲醇及10mL超纯水，流速为1mL/min；取上述快速溶剂萃取仪的萃取液30mL，加入600mL蒸馏水后混匀，采用已活化的固相萃取柱对该混合液进行固相萃取富集，控制流速为3mL/min；萃取结束后真空抽干HLB柱5min，以去除水分；利用2×3mL乙酸乙酯洗脱HLB柱，控制流速为1mL/min，洗脱液收集于10mL玻璃离心管中；洗脱液在氮气流下缓慢吹干，加入200μL乙腈/水(v/v)＝1∶1，漩涡混合；冷藏等待浓度测定。(2)利用液相色谱‑串联质谱联用分析雌激素浓度色谱柱：Nova‑Pak C18，3.9mm×150mm×4μm；梯度洗脱：采用甲醇和pH＝10的氨水为流动相，甲醇的比例在0‑1.2min内由15％升到70％，1.2‑2.0min内升到90％，2.0‑3.0min内升到98％，3.0‑6.1min维持在98％，6.1‑6.2min内降至15％，6.2‑10min内维持在15％，以上百分比均为体积百分比。(3)标准曲线的绘制，以外标法进行定量测定。(4)样品的测定采集待测土壤样品，按步骤(1)对土壤样品进行预处理，再按步骤(2)进行液相色谱‑串联质谱联用检测，并与步骤(3)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测土壤样品中天然和合成雌激素的含量。